| 犬CREBZF启动子对4种氨基酸缺失的应答效应 |
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| 引用本文： | 张亚妮,陆 锐.犬CREBZF启动子对4种氨基酸缺失的应答效应[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2011,39(10):191-198. |
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| 作者姓名： | 张亚妮 陆 锐 |
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| 作者单位： | 扬州大学 动物科学与技术学院;Department of Molecular and Cellular Biology |
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| 基金项目： | The Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada to R.L.；国家建设高水平研究型大学奖学金项目 |
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| 摘 要： | 【目的】研究犬CREBZF启动子对4种氨基酸(谷氨酸、亮氨酸、赖氨酸和蛋氨酸)缺失的应答效应。【方法】通过PCR和双酶切方法,从犬全血基因组中扩增5′侧翼区1 767bp的DNA片段,对其进行克隆测序分析后,构建全长及系列包含不同长度CREBZF启动子的表达载体,用Quikchange试剂盒构建了CREBZF启动子定点缺失载体,转染MDCK细胞24h后,用双荧光素酶报告系统检测在氨基酸缺失条件下表达载体的双荧光素酶活性。【结果】扩增到了犬CREBZF 5′侧翼区1 767bp的启动子序列,并成功构建了包含不同长度CREBZF启动子的荧光素酶报告基因表达载体pGL3-ZF-A,pGL3-ZF-B,pGL3-ZF-C,pGL3-ZF-D,pGL3-ZF-E,pGL3-ZF-F;其中pGL3-ZF-A(-1 767→+1bp)能够应答4种氨基酸缺失;定点缺失结果显示,当缺失亮氨酸时,-1 227→-1 219bp序列(5′-ATTCACTCA-3′)的缺失可使CREBZF的转录活性完全丧失,该序列与已知的其他氨基酸应答元件(Amino acid re-sponse element,AARE)的同源性达89%。【结论】5′-ATTCACTCA-3′是犬CREBZF启动子中应答氨基酸应激必不可少的调控元件。
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| 关 键 词： | CREBZF 氨基酸应答 转录活性 犬 |
| 收稿时间： | 2011/3/24 0:00:00 |
Response effect of dog CREBZF promoter on amino acid deprivation |
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| ZHANG Ya-ni,LU Rui.Response effect of dog CREBZF promoter on amino acid deprivation[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2011,39(10):191-198. |
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| Authors: | ZHANG Ya-ni LU Rui |
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| Institution: | ZHANG Ya-ni1,LU Rui2(1 College of Animal Science and Technology,Yangzhou University,Yangzhou,Jiangsu 225009,China,2 Department of Molecular and Cellular Biology,University of Guelph,Guelph,N1G 2W1,ON,Canada) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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