| ‘兰州百合’ISSR-PCR体系的优化 |
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| 引用本文： | 李谋强,师桂英,叶树辉,黄彦玮,边小荣.‘兰州百合’ISSR-PCR体系的优化[J].甘肃农业大学学报,2014(6):76-81. |
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| 作者姓名： | 李谋强 师桂英 叶树辉 黄彦玮 边小荣 |
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| 作者单位： | 1. 甘肃省作物遗传改良与种质创新实验室，甘肃农业大学园艺学院，甘肃 兰州 730070
2. 临洮县农技推广中心,甘肃 临洮,730500 |
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| 基金项目： | 甘肃省高等学校基本科研业务费项目，甘肃省农牧厅农业科技创新项目 |
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| 摘 要： | 以‘兰州百合’为试材,采用CTAB法提取百合嫩叶DNA,对‘兰州百合’ISSR-PCR反应体系的Taq酶、dNTP、引物和模板DNA进行4个因素4个水平优化试验,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳结果分析,最终获得的最佳反应体系为:25μL反应体系中含Taq DNA聚合酶0.5U,dNTP 0.3mmol/L,引物0.5μmol/L,模板DNA 60ng,10×Buffer(20mmol/L Mg2+plus)2.5μL,不足部分用ddH2O补足.在获得最佳反应体系的基础上确定了引物最佳退火温度为53℃,最佳循环次数45次.该优化体系以UBC873作为引物对18份‘兰州百合’材料DNA进行ISSR-PCR扩增,结果显示该优化体系具有较高的扩增稳定性.
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| 关 键 词： | ‘兰州百合’ ISSR-PCR 体系优化 |
Optimization of ISSR-PCR reaction system for ‘Lanzhou lily’ |
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| LI Mou-qiang,SHI Gui-ying,YE Shu-hui,HUANG Yan-wei,BIAN Xiao-rong.Optimization of ISSR-PCR reaction system for ‘Lanzhou lily’[J].Journal of Gansu Agricultural University,2014(6):76-81. |
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| Authors: | LI Mou-qiang SHI Gui-ying YE Shu-hui HUANG Yan-wei BIAN Xiao-rong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | ‘Lanzhou lily’ ISSR system optimization |
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