| 猪O型FMDV重组多表位抗原基因的克隆表达及免疫学鉴定 |
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| 引用本文： | 高明,邵军军,林彤,赵付荣,刘泽众,常惠芸,吴润.猪O型FMDV重组多表位抗原基因的克隆表达及免疫学鉴定[J].甘肃农业大学学报,2017,52(1):1-6. |
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| 作者姓名： | 高明 邵军军 林彤 赵付荣 刘泽众 常惠芸 吴润 |
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| 作者单位： | 1. 甘肃农业大学动物医学院,甘肃 兰州 730070;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,国家口蹄疫参考实验室,甘肃 兰州 730046;2. 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,国家口蹄疫参考实验室,甘肃 兰州 730046;3. 甘肃农业大学动物医学院,甘肃 兰州,730070 |
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| 基金项目： | "十二五"国家生猪现代产业技术体系项目 |
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| 摘 要： | 【目的】制备猪O型FMDV广谱多表位疫苗,并筛选最适合的免疫佐剂.【方法】选取O型FMDV 3个毒株VP1蛋白的优势表位,设计并合成重复串联表位基因3FoEN2,并克隆猪IgG重链恒定区基因.利用BamHⅠ,EcoRⅠ等位点将2个基因依次克隆到pProEX-HTb载体,构建重组质粒pE-IgG并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞.以IPTG诱导表达得到融合蛋白pE-IgG,经SDS-PAGE电泳分析,Western-blotting鉴定.分别用5种佐剂ISA206、ISA201、IMS1313、603、ISA61乳化融合蛋白配制疫苗免疫BALB/c雌鼠,间接ELISA方法测定抗体水平.【结果】重组蛋白以包涵体形式正确表达,大小为45kU,且能与感染O型FMDV的猪的阳性血清发生特异性免疫反应;ISA201佐剂试验组刺激机体产生的抗体水平最高.【结论】pE-IgG蛋白具有很强的免疫原性,与ISA201佐剂混合制备成的猪O型口蹄疫病毒多表位疫苗可刺激动物机体产生高水平抗体,是具有良好开发前景的疫苗.
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| 关 键 词： | 猪O型口蹄疫病毒 表位 佐剂 疫苗 |
Cloning expression and immunological identification of recombination multi-epitope gene of FMDV type O in pig |
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| GAO Ming,SHAO Jun-jun,LIN Tong,ZHAO Fu-rong,LIU Ze-zhong,CHANG Hui-yun,WU Run.Cloning expression and immunological identification of recombination multi-epitope gene of FMDV type O in pig[J].Journal of Gansu Agricultural University,2017,52(1):1-6. |
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| Authors: | GAO Ming SHAO Jun-jun LIN Tong ZHAO Fu-rong LIU Ze-zhong CHANG Hui-yun WU Run |
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