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遵义小钝吻鮠体表黏液抗菌肽的分离纯化
引用本文:肖贵榜,葛正龙,姜婧怡,张子萍,曾晓英.遵义小钝吻鮠体表黏液抗菌肽的分离纯化[J].广西农业科学,2015,46(5).
作者姓名:肖贵榜  葛正龙  姜婧怡  张子萍  曾晓英
作者单位:1. 遵义职业技术学院动物科学系,贵州遵义563006;遵义医学院生物化学与分子生物学教研室,贵州遵义563000
2. 遵义医学院生物化学与分子生物学教研室,贵州遵义,563000
3. 贵州省蚕业辣椒研究所,贵州遵义,563006
基金项目:贵州省优秀科技教育人才省长专项项目
摘    要:目的]从遵义小钝吻鮠(Leioxassis microcrassirostris Zunyiensis Xiao sp.nov.)体表黏液中获取高质量的抗菌肽,为提高其先天免疫能力及病害防治效果奠定基础.方法]采用物理方法收集遵义小钝吻鮠的体表黏液,以5%乙酸进行浸提,采用SephadexG-50和SephadexG-25两步凝胶层析技术对抗菌粗提物进行分离纯化,结合Tricine-SDS-PAGE电泳法进行分离鉴定,并运用牛津杯法和挖孔法进行抑菌试验.结果]遵义小钝吻鮠体表黏液经乙酸法浸提处理并冷冻干燥,其粗提物呈白色粉末,稀释液蛋白质含量为1755 μg/mL;经SephadexG-50凝胶层析分离,其纯化产物抑菌活性峰主要在峰Ⅱ和峰Ⅲ,抑菌圈直径11.66 mm;再经SephadexG-25凝胶层析分离纯化后出现单一活性峰,其产物为分子量小于4.1kD的抗菌肽,抑菌圈直径12.85mm.结论]遵义小钝吻鮠无需诱导刺激,可直接采用物理方法收集其体表黏液,以5%乙酸浸提后经SephadexG-50和SephadexG-25两步凝胶层析便可分离出纯度较高的抗菌肽.

关 键 词:遵义小钝吻鮠  体表黏液  抗菌肽  分离纯化  抑菌圈直径

Separation and purification of antimicrobial peptide from skin mucus of Leioxassis microcrassirostris Zunyiensis Xiao sp.nov.
XIAO Gui-bang,GE Zheng-long,JIANG Jing-yi,ZHANG Zi-ping,ZENG Xiao-ying.Separation and purification of antimicrobial peptide from skin mucus of Leioxassis microcrassirostris Zunyiensis Xiao sp.nov.[J].Guangxi Agricultural Sciences,2015,46(5).
Authors:XIAO Gui-bang  GE Zheng-long  JIANG Jing-yi  ZHANG Zi-ping  ZENG Xiao-ying
Abstract:
Keywords:L  microcrassirostris Zunyiensis Xiao sp  nov    skin mucus  antimicrobial peptides  separation and purification  antibacterial circle diameter
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