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总状毛霉甲壳素脱乙酰酶(CDA2)全长cDNA的克隆及原核表达
引用本文:蒋霞云,袁襄南,魏福卫,周培根,邹曙明.总状毛霉甲壳素脱乙酰酶(CDA2)全长cDNA的克隆及原核表达[J].上海海洋大学学报,2011,20(1):44-49.
作者姓名:蒋霞云  袁襄南  魏福卫  周培根  邹曙明
作者单位:上海海洋大学 食品学院;上海海洋大学 农业部水产种质资源与利用重点开放实验室;上海海洋大学 食品学院;上海海洋大学 食品学院;上海海洋大学 农业部水产种质资源与利用重点开放实验室
基金项目:上海海洋大学博士启动基金项目(080219);上海海洋大学优秀青年教师基金(080236)
摘    要:采用快速扩增cDNA末端(RACE)克隆技术,通过设计甲壳素脱乙酰酶简并引物,从总状毛霉Mucor racemosus菌丝体中克隆了CDA2的基因(EF468349)及其全长cDNA(DQ678929)序列。与已获得的总状毛霉菌 cda1基因相比, cda2基因中不含内含子。总状毛霉 cda2全长cDNA为1 378 bp,包含23-bp 5’端非翻译区、1 254 bp开放阅读框和101-bp 3’端非翻译区,编码一条由418个氨基酸残基组成的多肽链,其N端包含一段21个氨基酸残基组成的信号肽,在150~272氨基酸残基区存在一个多糖脱乙酰酶保守结构域。通过构建pET28a-cda2表达载体和进行原核表达研究,结果显示:原核表达产生的重组蛋白CDA2的分子量约为46 ku,表达形式以包涵体为主,纯化获得的重组蛋白CDA2具有甲壳素脱乙酰酶催化活性。本研究为进一步研究总状毛霉CDA2的结构和功能奠定了基础。

关 键 词:甲壳素脱乙酰酶  甲壳素脱乙酰酶2基因  cDNA克隆  总状毛霉  原核表达

Complete cDNA cloning and prokaryotic expression of chitin deacetylase CDA2 from Mucor racemosus
JIANG Xia-yun,YUAN Xiang-nan,WEI Fu-wei,ZHOU Pei-gen and ZOU Shu-ming.Complete cDNA cloning and prokaryotic expression of chitin deacetylase CDA2 from Mucor racemosus[J].Journal of Shanghai Ocean University,2011,20(1):44-49.
Authors:JIANG Xia-yun  YUAN Xiang-nan  WEI Fu-wei  ZHOU Pei-gen and ZOU Shu-ming
Abstract:
Keywords:chitin deacetylase  cda2  cDNA cloning  Mucor racemosus  prokaryotic expression
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