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大口黑鲈肝细胞原代培养方法的建立
引用本文:喻文娟,杨先乐,唐俊,郑宗林,张宁.大口黑鲈肝细胞原代培养方法的建立[J].上海海洋大学学报,2006(4):430-435.
作者姓名:喻文娟  杨先乐  唐俊  郑宗林  张宁
作者单位:上海水产大学农业部动植物病原库 上海200090
基金项目:国家自然科学基金;上海市教委资助项目;上海市重点学科建设项目
摘    要:取材大口黑鲈肝脏组织,培养其原代细胞,比较研究了组织块法和酶消化法两种培养方法及不同的培养条件,以确定其最佳培养方法和条件,同时观察了长期培养过程中肝细胞的形态变化。结果表明:组织块方法不适于大口黑鲈肝细胞的培养,未见细胞从组织块中迁出。而胰蛋白酶消化法获得良好稳定的培养效果。胰蛋白酶浓度0.25%,消化时间20 min,分步收集肝细胞,经台盼蓝检测和血球计数板计数,平均活力>90%,每克肝重可获得3×106个分离肝细胞。在细胞活力和数量两方面达到最佳平衡。在含20%胎牛血清、10μg/mL胰岛素的M199/L15培养基中,于4%CO2,28℃培养箱中长期培养并传代。

关 键 词:大口黑鲈  肝细胞  原代培养
收稿时间:2005/12/20 0:00:00

Study on primary culture of hepatocytes from Micropterus salmoides
YU Wen-juan,YANG Xian-le,TANG Jun,ZHENG Zong-lin,ZHANG Ning.Study on primary culture of hepatocytes from Micropterus salmoides[J].Journal of Shanghai Ocean University,2006(4):430-435.
Authors:YU Wen-juan  YANG Xian-le  TANG Jun  ZHENG Zong-lin  ZHANG Ning
Abstract:
Keywords:Micropterus salmoides  hepatocyte  primary culture
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