| 利用玉米作为生物反应器表达PEDV中和表位抗原蛋白 |
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| 引用本文： | 满坤,§,杨兵§,薛静§,覃湘婕,周宏专,徐福洲,许承扬,杨凤萍,张立全,李向龙,张晓东,王金洛.利用玉米作为生物反应器表达PEDV中和表位抗原蛋白[J].中国农业科技导报,2014,16(6):28-35. |
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| 作者姓名： | 满坤 § 杨兵§ 薛静§ 覃湘婕 周宏专 徐福洲 许承扬 杨凤萍 张立全 李向龙 张晓东 王金洛 |
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| 作者单位： | (1.北京市农林科学院, 北京 100097,3.北京农学院动物科学技术学院, 北京 102206) |
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| 基金项目： | 北京市科技计划项目（Z131100003113015）；北京市农林科学院科技创新能力建设专项(KJCX20140409)资助。 |
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| 摘 要： | 以玉米为生物反应器,将猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)主要中和抗原表位(core neutralizing epitope,COE)基因导入玉米自交系,获得了高效表达PEDV-COE的转基因玉米稳定株系。首先,根据玉米密码子的偏好性,设计合成优化的COE编码基因,构建了植物表达载体p BAC9036。然后,利用PDS1000/He基因枪转化玉米幼胚,经过愈伤组织诱导、分化再生培养,获得71株转化再生植株,进而通过田间草甘膦抗性筛选,获得2个T1代转基因玉米稳定株系。通过PCR、RT-PCR、间接ELISA和Western blot等鉴定结果显示,COE基因已成功整合到玉米基因组并进行了转录和蛋白表达。并且种子中COE蛋白占可溶性总蛋白的0.122%和0.078%。最后,提取转基因玉米稳定株系的种子可溶性蛋白,与佐剂混合皮下注射免疫小鼠并取可溶性蛋白灌胃免疫小鼠,均可产生针对PEDV抗原的特异性抗体。获得的转基因玉米可有效表达COE蛋白,表达产物具有显著的免疫原性,为进一步研制PEDV-COE转基因玉米疫苗奠定了基础。
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| 关 键 词： | 猪流行性腹泻病毒 中和抗原表位 转基因玉米 表达 |
Expression of Core Neutralizing Epitope Gene of Porcine Epidemic Diarrhea Virus in Maize |
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| MAN Kun,§,YANG Bing§,XUE Jing§,QIN Xiang\|jie,ZHOU Hong\|zhuan,XU F.Expression of Core Neutralizing Epitope Gene of Porcine Epidemic Diarrhea Virus in Maize[J].Journal of Agricultural Science and Technology,2014,16(6):28-35. |
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| Authors: | MAN Kun § YANG Bing§ XUE Jing§ QIN Xiang\|jie ZHOU Hong\|zhuan XU F |
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| Institution: | (1.Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Beijing 100097|2.Animal Science and Technology College, Beijing Agriculture College, Beijing 102206, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine epidemic diarrhea virus core neutralizing epitope transgenic maize expression |
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