| 不同保存方法对武汉单极虫DNA提取和PCR扩增的影响 |
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| 引用本文： | 陆宏达,刘俊杰,岳蒙蒙,操艮萍,李振伟.不同保存方法对武汉单极虫DNA提取和PCR扩增的影响[J].大连海洋大学学报,2016(3):246-251. |
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| 作者姓名： | 陆宏达 刘俊杰 岳蒙蒙 操艮萍 李振伟 |
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| 作者单位： | 上海海洋大学水产与生命学院,上海,201306 |
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| 基金项目： | 水产动物遗传育种上海市协同创新中心(ZF1206)，上海市重点学科建设项目(Y1101) |
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| 摘 要： | 为探讨不同保存方法对武汉单极虫Thelohanellus wuhanensis DNA提取和PCR扩增的影响,将从患武汉单极虫病的异育银鲫Carassius auratus gibelio鱼苗上分离出含有孢子的孢囊,分别置于100%乙醇、70%乙醇、2.5%戊二醛、10%福尔马林、Bouin's液、Carnoy's液和Müller's液中保存50 d,经计数调整孢子等量后分别进行DNA提取、常规PCR和巢式PCR扩增。结果表明:100%乙醇和70%乙醇保存方法对武汉单极虫孢子DNA提取、常规PCR和巢式PCR扩增均无任何影响,等同于新鲜孢子,可作为孢子的保存方法;2.5%戊二醛和Bouin's液保存方法只对孢子DNA提取有影响,但均能在常规PCR和巢式PCR扩增后出现特异电泳条带,可作为用于常规PCR和巢式PCR扩增的孢子保存方法;10%福尔马林和Müller's液保存方法对孢子DNA提取和常规PCR扩增均有影响,但均能在巢式PCR扩增后出现特异电泳条带,故只能作为用于巢式PCR扩增的孢子保存方法;Carnoy's液保存方法无论在孢子DNA提取还是进行常规PCR和巢式PCR扩增均无阳性结果,故不能用作孢子核酸分子生物学研究的保存方法。研究表明,除100%乙醇和70%乙醇保存方法外,其他保存方法对孢子DNA提取、常规PCR和巢式PCR扩增均有不同程度的影响。
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| 关 键 词： | 保存方法 武汉单极虫 DNA提取 PCR扩增 |
Effects of different preservation methods on DNA extraction and PCR amplification in parasite Thelohanellus wuhanensis |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | preservative method Thelohanellus wuhanensis DNA extraction PCR amplification |
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