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红鳍东方鲀防御素db-1基因的原核表达分析
引用本文:徐进,仇雪梅,高长富,王秀利.红鳍东方鲀防御素db-1基因的原核表达分析[J].大连海洋大学学报,2015(1).
作者姓名:徐进  仇雪梅  高长富  王秀利
作者单位:大连海洋大学 农业部北方海水增养殖重点实验室,辽宁 大连,116023
基金项目:国家海洋公益性行业科研专项
摘    要:采用原核表达方法高效表达红鳍东方鲀Takifugu rubripes防御素db-1基因,并获得该基因的重组表达产物。通过RT-PCR扩增获得红鳍东方鲀防御素db-1基因成熟肽编码序列,将其连入pET32a+载体,构建原核表达载体pET32a-m DB-1,然后将其转入至大肠杆菌表达菌株Rosetta(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导目的基因表达,通过SDS-PAGE和Western Blotting检测该蛋白,并利用Ni-NTA亲和层析纯化该蛋白,最后以Anti-Mus defensin Beta2抗体为探针的Elisa反应鉴定该蛋白。结果表明:红鳍东方鲀db-1基因在大肠杆菌中高效表达,并纯化得到了这种重组防御素融合蛋白。本研究中提供了一种简单、高效获取重组防御素蛋白的方法,可为其应用和生产提供支持。

关 键 词:红鳍东方鲀  防御素  原核表达  Elisa分析

Cloning and prokaryotic expression of defensin db-1 gene from redfin puffer Takifugu rubripes
Authors:XU Jin  QIU Xue-mei  GAO Chang-fu  WANG Xiu-li
Abstract:
Keywords:Takifugu rubripes  defensin  prokaryotic expression  Elisa analysis
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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