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| CRISPR/Cas9基因编辑技术介导SST基因敲除细胞的制备 | |
| 作者单位： | ;1.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室 |
| 摘 要： | 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术制备了SST基因敲除的细胞。在猪SST基因第一外显子区域设计2个向导RNA (sgRNA),用PX459构建成表达质粒,电转染猪胎儿的成纤维细胞,在48 h后用嘌呤霉素筛选细胞。通过PCR扩增、测序检测,在获得的13个克隆中,有2株细胞未检测到基因敲除,4株细胞发生单等位基因敲除,7株细胞为双等位基因删除。筛选到的纯合子单克隆细胞可用于制备SST基因删除猪。 |
| 关 键 词： | CRISPR/Cas9 基因编辑 SST基因 猪 敲除 |
Preparation of SST Knockout Cells Mediated by CRISPR/Cas9 Technology |
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