| 棘胸蛙抗菌肽Spinosan-D的原核表达及活性检测 |
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| 引用本文： | 程福珍,洪燕,郑荣泉,梅祎芸,王志刚,张丹丹,李贤露.棘胸蛙抗菌肽Spinosan-D的原核表达及活性检测[J].浙江农业科学,2019,60(7):1250-1255. |
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| 作者姓名： | 程福珍 洪燕 郑荣泉 梅祎芸 王志刚 张丹丹 李贤露 |
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| 作者单位： | 1.浙江师范大学野生动物保护与利用技术中心 野生动物生物技术与保护利用浙江省重点实验室,浙江 金华 321004; 2.浙江师范大学 行知学院,浙江 金华 321004 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31772482,31472015); 浙江省自然科学基金重点项目(LZ17C030001); 浙江省省院合作林业科技项目(2016SY12); 金华市科技计划项目(2013-2-1008) |
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| 摘 要： | 抗菌肽是一类具有多种生理活性,具备新型抗菌机制的多肽,是替代传统抗生素,成为新一代治疗药物的理想选择。本研究人工合成棘胸蛙抗菌肽Spinosan-D成熟区基因片段,双酶切原核表达载体pET-32a(+)后回收线性化载体,In-Fusion克隆技术构建重组质粒后转化至E.Coli DH5α感受态细胞,筛选阳性单菌落进行菌液PCR鉴定和测序,转化pET-32a(+)-Spinosan-D至BMBL21(DE3)pLysS菌株。通过优化诱导表达的时间、温度和异丙基株-β-D-硫代吡喃半半乳糖苷(IPTG)终浓度,实现棘胸蛙抗菌肽Spinosan-D融合蛋白的最优化表达,并检测其活性。本研究旨在为规模化制备Spinosan-D和进一步开发利用提供基础。
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| 关 键 词： | Spinosan-D 棘胸蛙 原核表达 |
| 收稿时间： | 2019-05-18 |
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