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Gateway技术构建酵母双杂分析用辣椒cDNA文库
引用本文:邱爱连,刘林林,蔡汉阳,朱万里,黄木坤,陈雄,何水林,张健.Gateway技术构建酵母双杂分析用辣椒cDNA文库[J].江西农业大学学报,2010,32(4).
作者姓名:邱爱连  刘林林  蔡汉阳  朱万里  黄木坤  陈雄  何水林  张健
作者单位:福建农林大学,生命科学学院,福建,福州,350002
基金项目:国家自然科学基金,福建省自然科学基金重点项目,福建省创新人才项目 
摘    要:构建cDNA文库是利用酵母双杂交技术开展特定cDNA分离的重要基础工作.利用Gateway技术,在成功提取辣椒总RNA并分离mRNA的基础上,合成了3种读码框的双链cDNA,通过BP反应构建其相应的入门文库,再通过LR反应将cDNA迅速且定向地重组到酵母双杂分析用目的载体pDESTTM22上,构建成高质量目的文库.经检测入门文库和目的文库滴度均达到(4.0~5.0)×106 cfu/ mL,文库总容量为(2.4~3.0)×107 cfu,平均插入片段大小为1 250 bp,其质量完全满足于进一步利用酵母双杂体系分析目的基因互作蛋白cDNA.

关 键 词:辣椒  入门文库  目的文库  酵母双杂

Construction of a cDNA Library of Pepper for Yeast Two-hybrid Analysis Using Gateway Technology
QIU Ai-lian,LIU Lin-lin,CAI Han-yang,ZHU Wan-li,HUANG Mu-kun,CHEN Xiong,HE Shui-lin,ZHANG Jian.Construction of a cDNA Library of Pepper for Yeast Two-hybrid Analysis Using Gateway Technology[J].Acta Agriculturae Universitis Jiangxiensis,2010,32(4).
Authors:QIU Ai-lian  LIU Lin-lin  CAI Han-yang  ZHU Wan-li  HUANG Mu-kun  CHEN Xiong  HE Shui-lin  ZHANG Jian
Abstract:
Keywords:Gateway
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