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猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因的克隆和序列分析及其基因表达
引用本文:舒邓群,茆达干,曹少先,吴志敏,陈荣达,杨利国.猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)基因的克隆和序列分析及其基因表达[J].江西农业大学学报,2007,29(2):234-240.
作者姓名:舒邓群  茆达干  曹少先  吴志敏  陈荣达  杨利国
作者单位:1. 南京农业大学,动物繁育研究所,江苏,南京,210095;江西农业大学,动物科技学院,江西,南昌,330045
2. 南京农业大学,动物繁育研究所,江苏,南京,210095
3. 江西农业大学,动物科技学院,江西,南昌,330045
4. 南京农业大学,动物繁育研究所,江苏,南京,210095;华中农业大学,动物科技学院,湖北,武汉,430070
基金项目:国家自然科学基金(30270959),南京农业大学校级青年创新基金(y200411)
摘    要:采取三元杂交猪的外周血,提取单核细胞总RNA,采用RT-PCR克隆猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)cDNA(GenBank登录号为DQ108393)。以pcDNA3.1(-)为质粒载体,构建猪GM-CSF基因真核表达质粒pGM-CSF,对克隆片段进行测序,并进行不同物种间同源性的比较。将重组质粒转染COS-7细胞,Western blotting鉴定表达蛋白的特异性。序列分析表明,GM-CSF的cDNA开放阅读框为435 bp,编码144个氨基酸和大部分信号肽,与用作PCR引物设计的参考序列比较,其核苷酸的同源性为97.5%,氨基酸的同源性为95.1%,同绵羊、人、牛、小鼠和犬的GM-CSF序列比较,其核苷酸的同源性分别为86.2%、80.5%、81.7%、69.7%和81.8%,氨基酸的同源性分别为78.5%、71.3%、70.3%、55.9%和71.5%。Western blotting证实目的基因可以在真核细胞中特异性的表达GM-CSF蛋白。以上结果表明,猪的GM-CSF基因被成功克隆,它存在着种属特异性。这为进一步研究该基因的生物学作用特别是利用GM-CSF增强DNA疫苗的免疫效果奠定了基础。

关 键 词:  粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子  基因克隆  序列分析  基因表达
文章编号:1000-2286(2007)02-0234-07
收稿时间:11 30 2006 12:00AM
修稿时间:2006年11月30

Cloning and Sequence Analysis of Porcine GM-CSF Gene and Its Gene Expression
SHU Deng-qun,MAO Da-gan,CAO Shao-xian,WU Zhi-Min,CHEN Rong-Da,YANG Li-guo.Cloning and Sequence Analysis of Porcine GM-CSF Gene and Its Gene Expression[J].Acta Agriculturae Universitis Jiangxiensis,2007,29(2):234-240.
Authors:SHU Deng-qun  MAO Da-gan  CAO Shao-xian  WU Zhi-Min  CHEN Rong-Da  YANG Li-guo
Abstract:
Keywords:porcine  granulocyte-macrophage colony stimulating factor(GM-CSF)  gene cloning  se-quence analysis  gene expression
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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