葡萄不同摘心处理下qRT-PCR内参基因的筛选与验证 |
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引用本文: | 赖呈纯,潘红,张静,王琦,高慧颖,陈源,黄贤贵.葡萄不同摘心处理下qRT-PCR内参基因的筛选与验证[J].江西农业大学学报,2019,41(5). |
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作者姓名: | 赖呈纯 潘红 张静 王琦 高慧颖 陈源 黄贤贵 |
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作者单位: | 福建省农业科学院 农业工程技术研究所,福建 福州 350003;福建省农产品(食品)加工重点实验室,福建 福州 350003;福建省农业科学院 农业工程技术研究所,福建 福州,350003 |
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基金项目: | 福建省自然科学基金;福建省星火计划;福建省农科院科技创新团队项目;福建省农科院科研项目 |
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摘 要: | 摘心处理是保证葡萄产量和品质的关键栽培技术之一,选择稳定可靠的内参基因,有利于葡萄摘心响应分子机制相关基因表达的研究。本研究以不同摘心处理的葡萄叶片和茎杆为材料,利用qRT-PCR分析15个候选内参基因Actin、AP-2、Cyclophilin、EF1-α、GAPDH、VAG、SAND、α-Tubulin、β-Tubulin、UBQ-L40、NAD5、ADH2、60SRP、18S rRNA、UBQ等在所供材料中的转录水平,并用RefFinder软件对候选内参基因稳定性进行综合评价。试验结果表明,葡萄叶片为材料的试验体系的最稳定内参基因为SAND和VAG,而葡萄茎杆为材料的试验体系以AP-2和Actin为最稳定的内参基因,且采用双内参基因组合,可以进一步提高试验结果的精确度;通过目的基因VvSS4转录水平数据标准化的验证,所获得的2组内参基因在各自的试验体系中可靠性高,可用于后续相关目的基因定量表达的研究。
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关 键 词: | 葡萄 摘心 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) 内参基因 表达稳定性 |
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