| 东北梅花鹿Galectin-1基因RNAi载体的构建 |
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| 引用本文： | 秦欣欣,孙红梅,褚文辉,王大涛,郭倩倩,章秀婷,李春义.东北梅花鹿Galectin-1基因RNAi载体的构建[J].东北农业大学学报,2013(9):57-62,2. |
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| 作者姓名： | 秦欣欣 孙红梅 褚文辉 王大涛 郭倩倩 章秀婷 李春义 |
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| 作者单位： | 江苏科技大学生物与化学工程学院;中国农业科学院特产研究所,吉林省特种经济动物分子生物学国家重点实验室培育基地 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31070878);973前期研究专项(2011CB111515) |
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| 摘 要： | 构建东北梅花鹿galectin-1基因特异小分子干扰RNA(shRNAs)真核干扰载体,并获得稳定感染生茸区骨膜细胞系。设计2对galectin-1 mRNA特异性shRNAs,两端分别带有ClaⅠ/MluⅠ酶切位点和一个9 nt发夹结构,通过基因克隆技术将其插入真核表达质粒pLVTHM中,构建galectin-1 shRNA表达载体,利用PCR和测序筛选出阳性质粒。将重组质粒与PPAX及pMD2.G共转染到293 t细胞中,在倒置显微镜下观察转染效果并收集、浓缩病毒质粒,感染生茸区骨膜细胞。结果表明,成功构建东北梅花鹿galectin-1基因RNAi载体,获得稳定传代被感染生茸区骨膜细胞系,为进一步研究galectin-1基因在鹿茸再生中的作用奠定基础。
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| 关 键 词： | 鹿茸再生 galectin-1基因 RNAi 生茸骨膜细胞 |
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