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鸡氨肽酶N蛋白多克隆抗体制备及其生物学功能研究
引用本文:李广兴,李兰兰,潘龙,洪琴,张恒,杨巍,黄小丹,马德星,张瑞莉,杨贵君.鸡氨肽酶N蛋白多克隆抗体制备及其生物学功能研究[J].东北农业大学学报,2015(2).
作者姓名:李广兴  李兰兰  潘龙  洪琴  张恒  杨巍  黄小丹  马德星  张瑞莉  杨贵君
作者单位:1. 东北农业大学动物医学学院,哈尔滨,150030
2. 东北农业大学动物医学学院,哈尔滨 150030; 上海药明康德新药开发有限公司生物部,上海 200131
3. 东北农业大学动物医学学院,哈尔滨 150030; 山东信得科技股份有限公司,山东 潍坊 262200
4. 东北农业大学动物医学学院,哈尔滨 150030; 黑龙江职业学院,哈尔滨 150080
基金项目:国家自然科学基金项目(31172295,31272569);黑龙江省自然科学基金项目
摘    要:试验参考Gen Bank上鸡氨肽酶N(g APN)基因序列(登录号为NM_204861.1)设计多对特异性引物,利用RT-PCR分段克隆g APN基因各段克隆产物并利用SOE-PCR将其进行连接,得到大小为2 906 bp的全长基因。利用原核表达载体p ET-30a(+)构建重组质粒p ET-g APN并转化E.coli Rosetta,经诱导表达得到大小为113 ku目的条带。以纯化g APN重组蛋白为免疫原制备兔抗g APN多克隆抗体,间接Elisa方法检测多抗血清效价为215。Western Blot试验证明,此多克隆抗体可以与原核表达的蛋白产生特异性条带,同时与18日龄鸡肾组织中获得的天然g APN蛋白样品有良好的反应性。间接免疫荧光试验显示,多克隆抗体可检测到pc DNA-g APN转染HELA细胞所表达的g APN蛋白。上述结果可为g APN蛋白的深入研究奠定基础。

关 键 词:鸡氨肽酶N  多克隆抗体  免疫印迹  间接免疫荧光

Preparation of polyclonal antibody against chicken amino peptidase N protein and its biological functions
LI Guangxing,LI Lanlan,PAN Long,HONG Qin,ZHANG Heng,YANG Wei,HUANG Xiaodan,MA Dexing,ZHANG Ruili,YANG Guijun.Preparation of polyclonal antibody against chicken amino peptidase N protein and its biological functions[J].Journal of Northeast Agricultural University,2015(2).
Authors:LI Guangxing  LI Lanlan  PAN Long  HONG Qin  ZHANG Heng  YANG Wei  HUANG Xiaodan  MA Dexing  ZHANG Ruili  YANG Guijun
Abstract:
Keywords:chicken amino peptidase N  polyclonal antiserum  Western Blot  indirect fluore-scence antibody assay
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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