| 菜心ISSR-PCR反应体系的优化 |
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| 引用本文： | 孙雪梅,乔爱民,孙敏,桂腾琴.菜心ISSR-PCR反应体系的优化[J].西南大学学报,2007,29(10):129-133. |
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| 作者姓名： | 孙雪梅 乔爱民 孙敏 桂腾琴 |
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| 作者单位： | 孙雪梅（西南大学,生命科学学院,重庆,400715;仲恺农业技术学院,农业与园林学院,广州,510225）;乔爱民（仲恺农业技术学院,农业与园林学院,广州,510225）;孙敏（西南大学,生命科学学院,重庆,400715）;桂腾琴（西南大学,生命科学学院,重庆,400715;仲恺农业技术学院,农业与园林学院,广州,510225） |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金资助项目(B1010412). |
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| 摘 要： | 以菜心(Brassica campestris L. ssp. Chinensis Var. utilis Tssen. et Lee.)为材料, 对影响ISSR-PCR扩增结果的因素如Mg2 、 Taq DNA聚合酶、 dNTPs、 Primer、模版DNA的浓度及引物退火温度、延伸时间和循环次数进行了探讨, 确立了适合菜心ISSR-PCR分析的最佳反应体系和PCR扩增参数 在25 μL反应体系中含10×buffer 2.5μL, 2.0 mmol/L Mg2 , 0.5 U Taq DNA聚合酶, 0.2 mmol/L dNTPs, 0.5 μmol/L引物, 30 ng模板DNA. PCR扩增程序 94 ℃预变性3 min; 94 ℃变性1 min, 49.7～56 ℃退火(退火温度随引物不同而定)1 min, 72 ℃延伸45 s, 40个循环; 72 ℃延伸5 min.
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| 关 键 词： | 菜心 简单序列重复间区(ISSR) 反应体系 |
| 文章编号： | 1673-9868(2007)10-0129-05 |
| 修稿时间： | 2007年4月3日 |
Optimization of an ISSR-PCR Reaction System in Flowering Chinese Cabbage |
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| SUN Xue-mei,QIAO Ai-min,SUN Min,GUI Teng-qin.Optimization of an ISSR-PCR Reaction System in Flowering Chinese Cabbage[J].Journal of Southwest Agricultural University,2007,29(10):129-133. |
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| Authors: | SUN Xue-mei QIAO Ai-min SUN Min GUI Teng-qin |
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