| 植物病毒沉默抑制子P25的原核表达及纯化 |
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| 引用本文： | 秦波,麻鹏达,伏秀青,杨涛,刘晶莹,董春光,王兴智.植物病毒沉默抑制子P25的原核表达及纯化[J].吉林农业大学学报,2005,27(4):378-380. |
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| 作者姓名： | 秦波 麻鹏达 伏秀青 杨涛 刘晶莹 董春光 王兴智 |
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| 作者单位： | 东北师范大学遗传与细胞研究所,长春,130024 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目（30370767） |
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| 摘 要： | 通过体外DNA重组技术将P25基因连接在pET28a（＋）载体上，构建成重组质粒。经PCR扩增、酶切鉴定及DNA序列分析，融合的P25基因序列正确。将重组质粒转化到大肠杆菌BL21（DE3）中进行异丙基β-D硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达，经过亲和层析得到纯品目的蛋白P25。
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| 关 键 词： | 基因沉默抑制子 P25蛋白 原核表达系统 |
| 文章编号： | 1000-5684（2005）04-0378-03 |
| 收稿时间： | 2005-01-07 |
| 修稿时间： | 2005-01-07 |
Expression of A RNA Silencing Suppressor in Eschcrichia coli and Its Purification |
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| QIN Bo,MA Peng-Da,FU Xiu-qing,YANG Tao,LIU Jing-ying,DONG Chun-guang,WANG Xing-zhi.Expression of A RNA Silencing Suppressor in Eschcrichia coli and Its Purification[J].Journal of Jilin Agricultural University,2005,27(4):378-380. |
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| Authors: | QIN Bo MA Peng-Da FU Xiu-qing YANG Tao LIU Jing-ying DONG Chun-guang WANG Xing-zhi |
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| Abstract: | The P25 gene was inserted into the pET-28a(+) vector to create a recombinant plasmid pET-28a(+)-P25. The resulted recombinant DNA was verified by PCR, restriction enzyme digestion and DNA sequencing. The P25 protein was then expressed in Eschcrichia coli and purified by Ni-NTA affinity chromatography after being induced by IPTG under denaturing condition. |
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| Keywords: | RNA silencing suppressor P25 protein prokaryotic expression system |
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