| 恶性疟原虫裂殖子新型蛋白质(PF3D7_0811600)的表达纯化及其多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 周健华,魏晓燕,常志广,姜宁,陆慧君,陈启军.恶性疟原虫裂殖子新型蛋白质(PF3D7_0811600)的表达纯化及其多克隆抗体的制备[J].吉林农业大学学报,2016(2):218-222. |
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| 作者姓名： | 周健华 魏晓燕 常志广 姜宁 陆慧君 陈启军 |
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| 作者单位： | 吉林大学人兽共患病研究所,人兽共患病教育部重点实验室,长春130062 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(81420108023) |
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| 摘 要： | 利用大肠杆菌原核表达并纯化恶性疟原虫3D7株裂殖子新型蛋白质PF3D7_0811600,免疫家兔制备特异性多克隆抗体,通过对虫体天然蛋白的识别,分析PF3D7_0811600在虫体内的表达。采用PCR技术从恶性疟原虫3D7株总DNA中获得PF3D7_0811600基因的目的片段,连接到p MD18-T克隆载体,得到的克隆质粒经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后,构建重组原核表达质粒p ET-PF3D7_0811600和p GEX-PF3D7_0811600,通过优化表达条件,分别在大肠杆菌中得到高效表达,并用亲和层析柱纯化目的蛋白质。用纯化的His标签重组蛋白质免疫家兔,用Western Blot方法检测制备的特异性多克隆抗体。结果表明:成功纯化并获得重组蛋白质,用间接ELISA方法检测多抗效价达到1∶16 000,用Western Blot检测结果表明制备的多克隆抗体具有良好的特异性,能够识别虫体天然蛋白。恶性疟原虫3D7株裂殖子新型蛋白质PF3D7_0811600在虫体晚期表达,说明该蛋白在虫体发育的晚期发挥重要作用,猜测其可能与裂殖子入侵宿主红细胞有关。
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| 关 键 词： | 恶性疟原虫 裂殖子 原核表达 多克隆抗体 |
Expression and Purification of the New Merozoite Surface Protein PF3D7_0811600 and Preparation of Polyclonal Antibody |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Plasmodium falciparum merozoite prokaryotic expression polyclonal antibody |
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