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微小毛霉凝乳酶的分泌表达、产物纯化及鉴定
引用本文:王景会,李玉秋,郑丽,李倬琳,高岩,杨贞耐.微小毛霉凝乳酶的分泌表达、产物纯化及鉴定[J].吉林农业大学学报,2011,33(4):395-398,417.
作者姓名:王景会  李玉秋  郑丽  李倬琳  高岩  杨贞耐
作者单位:1. 吉林省农业科学院农产品加工研究中心,长春130033;吉林农业大学食品科学与工程学院,长春130118
2. 吉林省农业科学院农产品加工研究中心,长春,130033
3. 吉林大学农业与生物工程学院,长春,130024
4. 吉林农业大学食品科学与工程学院,长春,130118
基金项目:国家“863”计划项目,现代农业产业技术体系建设专项
摘    要:采用基因工程的方法对微小毛霉(Mucor pusillus)凝乳酶进行分子改造,获得适于乳品工业生产用的凝乳酶,克隆到了微小毛霉凝乳酶基因,构建了酵母表达质粒pPIC9K/M。线性化后电击转入毕赤酵母GS115,在甲醇诱导下进行凝乳酶的初步发酵试验,通过pH反应及酶抑制反应试验证明,重组凝乳酶获得了分泌表达。SDS-PAGE分析表明重组凝乳酶的分子量约为46 kD,与理论值(45.3 kD)基本相符,培养基上清液中凝乳酶的活性为311.8 U/mL,纯化的总回收率为51.89%,纯度达到92%。

关 键 词:凝乳酶  分泌表达  毕赤酵母

Secretory Expression, Purification and Identification of Rennet from Mucor pusillus
WANG Jing-hui,LI Yu-qiu,ZHENG Li,LI Zhuo-lin,GAO Yan,YANG Zhen-nai.Secretory Expression, Purification and Identification of Rennet from Mucor pusillus[J].Journal of Jilin Agricultural University,2011,33(4):395-398,417.
Authors:WANG Jing-hui  LI Yu-qiu  ZHENG Li  LI Zhuo-lin  GAO Yan  YANG Zhen-nai
Institution:WANG Jing-hui1,2,LI Yu-qiu1,ZHENG Li3,LI Zhuo-lin1,GAO Yan2,YANG Zhen-nai11.Research Center of Agro-Product Processing,Jilin Academy of Agricultural Sciences,Changchun 130033,China,2.College of Food Science and Engineering,Jilin Agricultural University,Changchun 130118,3.College of Agriculture and Biological Engineering,Jilin University,Changchun,130024
Abstract:
Keywords:rennet  secretory expression  Pichia pastoris  
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