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| 胡椒ISSR反应体系的建立与优化 | |
| 引用本文： | 范睿,郝朝运,闫林,黄丽芳,谭乐和,杨建峰,邬华松.胡椒ISSR反应体系的建立与优化[J].热带农业科学,2012,32(6):25-30. |
| 作者姓名： | 范睿 郝朝运 闫林 黄丽芳 谭乐和 杨建峰 邬华松 |
| 作者单位： | 1. 中国热带农业科学院香料饮料研究所,海南万宁571533 农业部香辛饮料作物遗传资源利用重点实验室,海南万宁571533 2. 中国热带农业科学院香料饮料研究所,海南万宁571533 海南省热带香辛饮料作物遗传改良与品质调控重点实验室,海南万宁571533 3. 中国热带农业科学院香料饮料研究所,海南万宁571533 农业部香辛饮料作物遗传资源利用重点实验室,海南万宁571533 海南省热带香辛饮料作物遗传改良与品质调控重点实验室,海南万宁571533 |
| 基金项目： | 公益性行业(农业)科研专项经费，南亚热作专项，海南省自然科学基金 |
| 摘 要： | 通过单因子、双因子实验研究了胡椒ISSR-PCR反应体系中热参数和5个主要成分,即退火温度、循环数、变性时间、退火时间、延伸时间以及Mg2+、dNTPS、引物、模板DNA、TaqDNA聚合酶对扩增结果的影响,建立了适合胡椒ISSR分析的反应体系和扩增程序,即在25μL反应体系中,内含2 mmol/L Mg2+、200μmol/LdNTPS、1×PCR Buffer、2μmol/L引物、100 ng模板、1 U Taq DNA聚合酶。扩增程序为94℃预变性3 min,94℃变性120 s,复性60 s,72℃延伸3 min,循环35个,结束后72℃延伸7 min。这一优化体系的建立为今后利用ISSR标记技术进行胡椒种质鉴定、遗传多样性分析奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 胡椒 ISSR 反应体系 |
Establishment and Optimization of ISSR Reaction System for Piper nigrum L. |
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| Keywords: | |
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