| 春兰SRAP-PCR反应体系的建立与优化 |
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| 引用本文： | 袁媛,孙叶,李风童,包建忠,陈秀兰.春兰SRAP-PCR反应体系的建立与优化[J].安徽农业科学,2018,46(17):105-107. |
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| 作者姓名： | 袁媛 孙叶 李风童 包建忠 陈秀兰 |
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| 作者单位： | 江苏里下河地区农业科学研究所,江苏扬州,225007;江苏里下河地区农业科学研究所,江苏扬州,225007;江苏里下河地区农业科学研究所,江苏扬州,225007;江苏里下河地区农业科学研究所,江苏扬州,225007;江苏里下河地区农业科学研究所,江苏扬州,225007 |
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| 基金项目： | 江苏省农业科技自主创新项目(CX(16)1023) |
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| 摘 要： | 目的]构建适合春兰SRAP-PCR反应的最佳体系。方法]对影响PCR反应的5个变量(dNTPs浓度、Mg~(2+)浓度、引物浓度、Taq酶量、模板DNA用量)采用L16(45)正交试验设计,建立春兰SRAP-PCR最适反应体系。结果]最佳优化体系为0.25 mmol/L d NTPs、2.50 mmol/L Mg~(~(2+))、0.80μmol/L引物、1.00 U Taq酶、200.00 ng模板DNA,共20μL。扩增程序:94℃预变性4 min,反应前5个循环在94℃变性1 min、35℃复性1 min、72℃延伸1 min的条件下运行,随后的30个循环复性温度提高至50℃,最后72℃延伸10 min。结论]该体系有利于SRAP分子标记在春兰材料上的应用,为春兰分子遗传育种奠定了基础。
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| 关 键 词： | 春兰 SRAP-PCR 正交试验设计 体系优化 |
Establishment and Optimization of SRAP-PCR Reaction System of Cymbidium goeringii |
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