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纳升级反相液相色谱-串联质谱法分析麦氏弧菌蛋白质组
引用本文:李正义,贾俊涛,姜英辉,王骏,罗继,崔淑华,徐彪,梁成珠,张铁军.纳升级反相液相色谱-串联质谱法分析麦氏弧菌蛋白质组[J].安徽农业科学,2015(33).
作者姓名:李正义  贾俊涛  姜英辉  王骏  罗继  崔淑华  徐彪  梁成珠  张铁军
作者单位:1. 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心,山东青岛,266002;2. AB SCIEX公司上海应用实验室,上海,200233
摘    要:目的]较系统地研究分析麦氏弧菌提取蛋白质.方法]利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和纳升级反相液相色谱-串联质谱(nano-RPLC-MS/MS)法系统分析了来源于美国龙虾的一株麦氏弧菌F5-1提取总蛋白和总蛋白直接酶解产物,并进行数据库检索鉴定蛋白质.纳升级反相液相色谱分析条件为:上样量为5ul,经C18预柱(200 μm ×0.5 mm,3μmn,120 A)脱盐10 min,再经过ChromXPC18-CL毛细管柱(75 μm×15 cm,3μ,m,120 A)分析,2%乙腈(0.1%甲酸)-98%乙腈(0.1%甲酸)梯度洗脱90 min,采用ESI-Q-TOF MS,在IDA采集模式下分析鉴定麦氏弧菌提取总蛋白酶解产物.结果]直接酶解鉴定到1 538种蛋白质,通过Gene Ontolo-gy分析了麦氏弧菌F5-1提取总蛋白的分子功能、生物进程和细胞组分.提取的麦氏弧菌蛋白具有催化、结合、结构分子、转录调节因子等功能活性,其中催化活性的蛋白比例较大,且多为参与代谢进程的相关酶类.结论]研究可为麦氏弧菌蛋白质组学的深入研究奠定基础.

关 键 词:纳升及反相液相色谱-串联质谱  麦氏弧菌  蛋白质组

Proteomic Analysis of Vibrio Metschnikovii from Homarus americanus by Nanoflow Reversed Phase Liquid Chromatography-tandem Mass Spectrometry
Abstract:
Keywords:Nanoflow reversed phase liquid chromatography-tandem mass spectrometry  Vibrio metschnikovii  Proteomics
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