实时荧光定量PCR法检测抗虫棉历基因拷贝数方法的建立 |
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引用本文: | 闫喜中,张锐,孟志刚,孙国清,周涛,郭三堆.实时荧光定量PCR法检测抗虫棉历基因拷贝数方法的建立[J].安徽农业科学,2008,36(26). |
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作者姓名: | 闫喜中 张锐 孟志刚 孙国清 周涛 郭三堆 |
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作者单位: | 中国农业科学院生物技术研究所/国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程,北京100081;山西农业大学农学院,山西太谷030801;中国农业科学院生物技术研究所/国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程,北京,100081 |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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摘 要: | 目的]建立并完善Taqman实时荧光定量PCR检测转基因抗虫棉Bt基因的方法.方法]通过Bt基因序列,利用软件Primer5.0设计引物和探针.然后利用10倍系列稀释含有目的基因的质粒pG4AB,进行实时荧光定量PCR反应,制作标准曲线.结果j抗虫基因拷贝数与Ct值的关系为Ct=-3.549 632X 43.783 512,相关系数R2为0.997 867.结论]实时荧光定量PCR检测转基因抗虫棉Bt基因的方法具有特异性好、灵敏度高的特点.
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关 键 词: | Bt基因 实时荧光定量PCR 标准曲线 |
Establishing a Real4ime Quantitative PCR Assay for Detecting the Copy Number of Bt Gene in Transgenic Insect-resistant Cotton |
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