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高山杜鹃ISSR-PCR反应体系建立
引用本文:石绍高,孙正海,李世峰,解玮佳,刘邦,王永路.高山杜鹃ISSR-PCR反应体系建立[J].安徽农业科学,2013(27):10977-10979,11040.
作者姓名:石绍高  孙正海  李世峰  解玮佳  刘邦  王永路
作者单位:云南省昭通市永善县务基林业站,云南昭通,657302;西南林业大学园林学院,云南昆明,650224;云南省农业科学院花卉研究所,云南昆明,650205;普洱市景东县住房和城乡建设局,云南普洱,676200
基金项目:云南省应用基础研究项目(2010ZC089);国家林业局西南地区生物多样性保育重点实验室开放基金(BC2010F04);西南林业大学博士科研启动项目;云南省园林植物与观赏园艺重点学科建设资助
摘    要:目的]建立高山杜鹃的ISSR—PCR反应体系。方法]运用正交试验分析模板DNA、TaqDNA聚合酶、Primer、Mg^2+和dNTPs5个因子对杜鹃ISSR-PCR反应影响,建立高山杜鹃ISSR-PCR反应体系。结果]杜鹃ISSR—PCR25m反应体系中5个因子较适水平为:DNA模板浓度为1.6ng/μl,TaqDNA聚合酶浓度为0.040U/μl,Primer浓度为0.64mmol/L,dNTPs浓度为0.68mmol/L,Mg^2+浓度为2.08mmol/L。结论]研究结果为利用ISSR分子标记技术研究杜鹃提供了理论支持。

关 键 词:高山杜鹃[Rhododendron  lapponicum  (L.)  Wahl.]  ISSR-PCR反应  体系建立

Establishment of ISSR - PCR Reaction System for Rhododendron lapponicum
Institution:SHI Shao-gao et ai (Wuji Forestry Station of Yongshan County, Zhaotong, Yunnan 657302)
Abstract: Objective] To establish ISSR-PCR reaction system for Rhododendron lapponicum. Method] Effects of five factors (DNA template, TngDNA, Primer, Mg^2+ and dNTPs) on ISSR-PCR reaction of Rhododendron lapponicum were analyzed by orthogonal design for establishing and optimizing ISSR-PCR reaction system. Result] As a result, the optimal ISSR -PCR reaction system (25 μl) mixture contained 40. 013 ng DNA template, 1.0 U TagDNA, 0.64 mmol/L primer, 2.08 mmol/L Mg^2+ and 0.68 mmol/L dNTPs. Conclusion] Theory sustaining for researching Rhododendron by ISSR molecular marker were afforded from this experiment.
Keywords:Rhododendron lapponicum ( L  ) Wahl    ISSR - PCR reaction  System establishment
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