半巢式RT-Realtime PCR方法检测藜草花叶病毒 |
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引用本文: | 贺丽娜,李金庆,厉艳,粟智平,封立平,鲁闽,段效辉,王颖,刘宁.半巢式RT-Realtime PCR方法检测藜草花叶病毒[J].安徽农业科学,2019,47(2):194-196. |
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作者姓名: | 贺丽娜 李金庆 厉艳 粟智平 封立平 鲁闽 段效辉 王颖 刘宁 |
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作者单位: | 蓬莱检验检疫综合技术服务中心,山东烟台,265600;烟台出入境检验检疫局检验检疫技术中心,山东烟台,264000;山东检验检疫技术中心,山东青岛,266002 |
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基金项目: | 国家质量基础的共性技术研究与应用专项;重点专项项目;山东出入境检验检疫局科技项目;山东出入境检验检疫局科技项目;烟台市科技发展计划项目;质检总局科技项目;质检总局科技项目;质检总局科技项目 |
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摘 要: | 目的]根据藜草花叶病毒(SoMV)全基因组中多聚蛋白质基因序列保守区,分别设计2套TaqMAN探针和引物,建立半巢式实时荧光PCR检测SoMV的新方法。方法]提取病毒核酸进行反转录操作合成cDNA,依据设计好的2套TaqMAN探针和引物,分别进行实时荧光PCR特异性与灵敏度检测,并进行2套引物探针的扩增效率对比试验。结果]方法特异性强,灵敏度高达0.4 fg/μL植物总RNA,2套引物探针的扩增效率试验对比结果显示扩增效率几乎完全一样。结论]该方法适用于藜草花叶病毒的检疫鉴定。
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关 键 词: | 藜草花叶病毒 半巢式实时荧光PCR 检测 |
Detection of Sowbane mosaic virus by Semi-nested Real-time PCR Method |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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