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珍稀濒危植物大果木莲ISSR-PCR反应体系的建立
引用本文:毛云玲,陈少瑜,韩燕,吴涛,司马永康,郝佳波,付玉嫔.珍稀濒危植物大果木莲ISSR-PCR反应体系的建立[J].安徽农业科学,2009,37(31):15163-15166.
作者姓名:毛云玲  陈少瑜  韩燕  吴涛  司马永康  郝佳波  付玉嫔
作者单位:1. 云南省林业科学院,国家林业局云南珍稀濒特森林植物保护和繁育重点实验室,云南省森林植物培育与开发利用重点实验室,云南昆明,650204
2. 西南林学院资源学院,云南昆明,650224
基金项目:云南省自然科学基金项目 
摘    要:目的]建立高效稳定的大果木莲ISSR—PcR反应体系。方法]以珍稀濒危植物大果木莲新鲜嫩叶为材料,在高盐沉淀法提取高质量基因组DNA的基础上,通过ISSR—PcR反应体系中5个主要因素的单因子梯度试验,优化并最终建立了大果木莲稳定而高效的ISSR—PCR反应体系和反应程序,结果]试验建立的大果木莲的ISSR—PCR反应体系为:20.0山反应体系中含10×buffer2.0Ixl、Mg2+2.0mmol/L、Taq酶0.5U、DNA模板40ng、引物O.8μmol/L、dNTPs0.2mmol/L和ddH2O13.3μl,其反应程序为:94℃预变性5min;94℃变性1min,50~60℃退火45s,72℃延伸2min,40个循环;72℃完全延伸7min。结论]该研究为进一步揭示大果木莲群体的遗传多样性和遗传结构状况以及制定科学的保护措施提供了理论依据。

关 键 词:珍稀濒危植物  大果木莲  基因组DNA  ISSR—PCR反应体系

Establishment of ISSR-PCR Reaction System for the Rare and Endangered Plant Manglietia grandis Hu et Cheng
MAO Yun-ling et al.Establishment of ISSR-PCR Reaction System for the Rare and Endangered Plant Manglietia grandis Hu et Cheng[J].Journal of Anhui Agricultural Sciences,2009,37(31):15163-15166.
Authors:MAO Yun-ling
Institution:MAO Yun-ling et al (Yunnan Academy of Forestry,Yunnan Key Laboratory for the Protection , Propagation of Rare , Endangered Forest Plants of State Forestry Bureau,Key Laboratory for the Cultivation , Exploitation of Forest Plants in Yunnan Province,Kunming,Yunnan 650204)
Abstract:Objective] The study aimed to establish the effective and stable ISSR-PCR reaction system for Manglietia grandis Hu et Cheng.Method] With the leaves of rare and endangered plant M.grandis as tested material,based on high quality DNA extracted by high salt precipitation method,the single factor grade experiment with 5 factors in ISSR-PCR reaction system was taken to optimize and finally establish the effective and stable ISSR-PCR reaction system through single-factor gradient test.Result] The effective an...
Keywords:Rare and endangered plants  Manglietia grandis Hu et Cheng  Genomic DNA  ISSR-PCR reaction system  
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