| 柽柳cpSSR-PCR反应体系的建立和优化 |
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| 引用本文： | 张如华,张连梅.柽柳cpSSR-PCR反应体系的建立和优化[J].安徽农业科学,2019,47(9):105-107. |
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| 作者姓名： | 张如华 张连梅 |
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| 作者单位： | 临沂大学生命科学学院,山东临沂,276005;临沂大学图书馆,山东临沂,276005 |
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| 摘 要： | 目的]建立并优化柽柳cpSSR-PCR反应体系和反应条件。方法]对影响PCR反应的5个变量(Mg~(2+)浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度、模板DNA浓度)进行L_(16)(4~5)正交试验设计,并对引物退火温度进行梯度筛选。结果]最优反应体系:Mg~(2+) 2.0 mmol/L、dNTPs 0.125 mmol/L、Taq DNA聚合酶0.25 U、引物0.25μmol/L、模板DNA 20 ng,共10μL。反应程序:94℃预变性4 min;94℃30 s,引物退火温度30 s,72℃30 s,30个循环;72℃延伸10 min。结论]该反应体系成功扩增1个柽柳天然群体的23个个体,为柽柳群体扩散路线的确定奠定基础。
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| 关 键 词： | 柽柳 叶绿体微卫星 反应体系 正交试验 |
Establishment and Optimization of cpSSR-PCR Reaction System of Tamarix chinensis |
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