| 传染性脾肾坏死病毒（ISKNV）ORF086基因的表达·纯化及其抗体的制备 |
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| 引用本文： | 彭媛媛,付小哲,石存斌,余露军,李宁求,吴淑勤.传染性脾肾坏死病毒（ISKNV）ORF086基因的表达·纯化及其抗体的制备[J].安徽农业科学,2009,37(11). |
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| 作者姓名： | 彭媛媛 付小哲 石存斌 余露军 李宁求 吴淑勤 |
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| 作者单位： | [1]上海海洋大学,上海201306 [2]中国水产科学研究院珠江水产研究所,广东广州510380 |
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| 摘 要： | 目的]构建传染性脾肾坏死病毒（ISKNV）ORF086基因的融合表达载体,制备抗体为进一步研究ORF086蛋白的免疫保护性提供前提条件。方法]PCR扩增目的基因,构建重组质粒,经酶切鉴定,PCR和核酸序列分析后,IPTG诱导表达,Ni-柱纯化,注射新西兰白兔获得抗血清。结果]扩增出ORF086基因,成功构建了重组质粒pET32a-ORF086,SDS-PAGE电泳和Western-blot分析显示,获得一条36.0 kD的融合蛋白。结论]成功构建了原核表达载体,融合蛋白主要以包涵体的形式存在,经柱层析纯化蛋白,纯度达90%以上。
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| 关 键 词： | 传染性脾肾坏死病毒（ISKNV） 表达 纯化 抗体 |
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