| 猪轮状病毒VP4蛋白基因在大肠杆菌中的表达 |
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| 引用本文： | 肖长峰,刘成倩,卢永红,陈斌,吴双林,张天庆,易建中.猪轮状病毒VP4蛋白基因在大肠杆菌中的表达[J].安徽农业科学,2009,37(22):10431-10432. |
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| 作者姓名： | 肖长峰 刘成倩 卢永红 陈斌 吴双林 张天庆 易建中 |
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| 作者单位： | 上海海洋大学水产与生命学院,上海,201306;内蒙古农业大学动物科学与医学学院,内蒙古呼和浩特,010018;上海海洋大学水产与生命学院,上海,201306;上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海,201106;上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海,201106 |
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| 摘 要： | 目的]研究猪的轮状病毒VP4蛋白基因在BL21大肠杆菌中的表达。方法]以猪肺脏组织中分离的总RNA为模板，采用反转录聚合酶链式反应（1it—PCR）技术扩增VP4蛋白的部分基因，将PCR产物克隆到表达载体pGEX-4T-1中，构建原核表达质粒PGEX-4T-1-VP4并对重组质粒进行酶切和测序鉴定。将重组载体PGEx4T-1-VP4转化至大肠杆菌BL21（DE3）中进行诱导表达和SDS—PAGE分析，并对重组大肠杆菌进行可溶性分析。结果]对猪肺脏组织中分离的总RNA进行RT—PCR扩增，获得875bp的VP4部分基因，重组质粒PGEX-4T-1-VP4经BamHI和Xho Ⅰ双酶切和测序鉴定后，插入的猪轮状病毒VP4的eDNA编码区序列与已公布的猪GenBank核酸序列比对结果为99．5％；将重组质粒pGEX-4T-1-VP4-一转化至大肠杆菌B121（DE3）中，经IPTG诱导和SDS-PAGE分析，可见约58kDa融合蛋白带。结论]该研究为进一步研究轮状病毒的疫苗研制奠定了基础。
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| 关 键 词： | 轮状病毒 VP4基因 克隆 原核表达 |
Expression of Porcine Rotavirus VP4 in Escherichia coli |
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| XIAO Chang-feng et al.Expression of Porcine Rotavirus VP4 in Escherichia coli[J].Journal of Anhui Agricultural Sciences,2009,37(22):10431-10432. |
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| Authors: | XIAO Chang-feng |
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| Institution: | XIAO Chang-feng et al (College of Fisheries , Life,Shanghai Ocean University,Shanghai 201306) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Porcine rotavirus VP4 gene Cloning Prokaryotic expression |
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