玉叶金花SSR-PCR体系的优化 |
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引用本文: | 郑艳,胡章立,陈涛.玉叶金花SSR-PCR体系的优化[J].安徽农业科学,2018(13). |
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作者姓名: | 郑艳 胡章立 陈涛 |
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作者单位: | 深圳大学生命与海洋科学学院;深圳市中国科学院仙湖植物园 |
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摘 要: | 目的]优化玉叶金花SSR-PCR扩增反应体系。方法]以红纸扇为材料,采用正交设计和单因素试验方法,从Mg~(2+)、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物、模板DNA浓度以及退火温度4个方面对玉叶金花SSR-PCR体系进行优化,并采用4对SSR引物和4种玉叶金花植物样品进行验证。结果]玉叶金花20μL的SSR-PCR反应最优体系为Mg~(2+)浓度1.50 mmol/L、d NTPs浓度0.150 mmol/L、引物浓度0.45μmol/L、TaqDNA聚合酶2.00 U、模板DNA 15 ng、退火温度53.4℃。结论]该反应体系的扩增条带清晰、稳定、重复性好,可用于玉叶金花的SSR分子标记开发、物种分子鉴定、遗传多样性分析和谱系关系构建等相关研究。
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