| Taqman定量PCR技术检测转基因大豆中外源基因拷贝数 |
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| 引用本文： | 仇有文,张明辉,高学军,曲波,敖金霞,袁肖寒,刘营,霍楠.Taqman定量PCR技术检测转基因大豆中外源基因拷贝数[J].安徽农业科学,2011,39(17):10150-10152. |
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| 作者姓名： | 仇有文 张明辉 高学军 曲波 敖金霞 袁肖寒 刘营 霍楠 |
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| 作者单位： | 东北农业大学生命科学与生物技术研究中心,农业部转基因生物产品成分监督检测测试中心,黑龙江,哈尔滨,150030;东北农业大学生命科学与生物技术研究中心,农业部转基因生物产品成分监督检测测试中心,黑龙江,哈尔滨,150030;东北农业大学生命科学与生物技术研究中心,农业部转基因生物产品成分监督检测测试中心,黑龙江,哈尔滨,150030;东北农业大学生命科学与生物技术研究中心,农业部转基因生物产品成分监督检测测试中心,黑龙江,哈尔滨,150030;东北农业大学生命科学与生物技术研究中心,农业部转基因生物产品成分监督检测测试中心,黑龙江,哈尔滨,150030;东北农业大学生命科学与生物技术研究中心,农业部转基因生物产品成分监督检测测试中心,黑龙江,哈尔滨,150030;东北农业大学生命科学与生物技术研究中心,农业部转基因生物产品成分监督检测测试中心,黑龙江,哈尔滨,150030;东北农业大学生命科学与生物技术研究中心,农业部转基因生物产品成分监督检测测试中心,黑龙江,哈尔滨,150030 |
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| 基金项目： | 哈尔滨市科技局项目(2010RFQXN101); 转基因重大专项课题子课题(2008ZX08012-001) |
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| 摘 要： | 目的]采用Taqman定量PCR技术检测转基因杂交大豆中外源，Ⅲ终止子基因的拷贝数。方法]以大豆凝集素基因为内参照基因，以非转基因大豆基因组DNA为内参照基因标准品，通过梯度稀释法分别求取了内参照基因和质粒DNA的cz值与拷贝数对数值的相关性标准曲线方程，并通过将得到的0值代入标准曲线方程求取了样品的拷贝数。结果]内参照基因标准曲线方程为Y=-3．422x＋35．201，R^2=O．998；外源基因标准曲线方程为Y=-3．348x＋34．890，R^2=0．999。nos终止子基因及其下游边界序列在转基因杂交大豆中为单拷贝。结论]为确定转基因大豆外源基因拷贝数提供了理论依据。
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| 关 键 词： | Real-time PCR 转基因杂交大豆 拷贝数 Lectin nos终止子基因边界序列 |
Detection of Foreign Gene Copies in Transgenic Soybean by Taqman Quantitative PCR Technique |
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| QIU You-wen et al.Detection of Foreign Gene Copies in Transgenic Soybean by Taqman Quantitative PCR Technique[J].Journal of Anhui Agricultural Sciences,2011,39(17):10150-10152. |
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| Authors: | QIU You-wen |
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| Institution: | QIU You-wen et al (Life Science and Biotechnique Research Center of Northeast Agricultural University/Testing and Inspecting Center for GMO,Harbin,Heilongjiang 150030) |
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| Abstract: | Objective] It is to adopt Taqman quantitative PCR technique to detect the copies of foreign nos terminator in transgenic hybrid soybean. Method] With endogenous reference gene of soybean lectin, and endogenous reference standard of gene complex DNA in non-GMO soybeans, the method of gradient dilution was used to separately calculate Ct value of endogenous reference gene and plasmid DNA and relevance standard curve equation of logarithm of copies, and then to calculate the copies of samples through substit... |
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| Keywords: | Real-time PCR Transgenic hybrid soybean Copies Lectin Boundary sequence of nos terminator gene |
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