| 植物病毒表达载体pClYVV/CP/W的构建及GFP表达的研究 |
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| 引用本文： | 王振东,王晓华,孟鹏,秦会权,郑新伟,刘芳普,薛立江,张敏.植物病毒表达载体pClYVV/CP/W的构建及GFP表达的研究[J].安徽农业科学,2009,37(28). |
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| 作者姓名： | 王振东 王晓华 孟鹏 秦会权 郑新伟 刘芳普 薛立江 张敏 |
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| 作者单位： | 沈阳农业大学生物科学技术学院,辽宁沈阳,110161;辽宁省沈阳市农业检测中心,辽宁沈阳,110034;深圳市九升生物制品有限公司,广东深圳,518029 |
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| 基金项目： | 辽宁省自然基金资助项目，辽宁省教育厅资助项目 |
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| 摘 要： | 目的]研究植物病毒表达载体pC1YVV/CP/W的构建及用pC1YVV/CP/W表达绿色荧光蛋白(GFP),为植物反应器生产有用蛋白、开发有效的植物病毒载体提供参考。方法]用三叶草黄脉病毒侵染性全长cDNA克隆pC1YVV基因组的Mb/CP基因之间的一段多克隆位点和两侧含有病毒蛋白酶NIa切割识别序列的多聚脱氧核糖核苷酸接头,构建pC1YVV/CP/W载体,并将绿色荧光蛋白基因插入pC1YVV/CP/W中构建pC1YVV/CP/W/GFP载体,用反转录PCR对重组病毒克隆转录情况进行检测,并用Western杂交对重组病毒克隆表达的目的基因产物进行测定。结果]pC1YVV/CP/W/GFP接种的蚕豆幼苗表现出与野生型C1YVV相同的症状,发病率达100%,表明重组病毒克隆pClYVV/CP/W/GFP有侵染性,外源基因的插入没有破坏载体pClYVV/CP/W的开放阅读框;外源基因在F_4子代病毒基因组中稳定存在;重组病毒克隆pC1YVV/CP/W/GFP至少到F_4子代病毒能稳定表达GFP。结论]该研究结果为用植物表达有用蛋白提供了有用的植物病毒载体。
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| 关 键 词： | 植物病毒表达载体 pC1YVV/CP/W pC1YVV/CP/W/GFP 构建 表达 |
Study on Construction of Plant Virus Expression Vector pC1 YVV/CP/W and Expression of GFP |
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| WANG Zhen-dong et al.Study on Construction of Plant Virus Expression Vector pC1 YVV/CP/W and Expression of GFP[J].Journal of Anhui Agricultural Sciences,2009,37(28). |
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| Authors: | WANG Zhen-dong |
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| Institution: | WANG Zhen-dong et al(College of Bioscience , Technology,Shenyang Agricultural University,Shenyang,Liaoning 110161) |
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| Abstract: | Objective]The aim was to research the construction of plant virus expression vector pC1YVV/CP/W and expression of GFP,and provide some reference for plant-bioreactor producing useful protein and developing effective plant virus vector.Method]A section of multiple cloning sites among NIb/CP genes in pC1YVV genome and deoxyribonucleotide polylinker of cutting recognition sequence containing viral protease NIa were cloned with infectivity full-length cDNA of clover yellow vein virus,and pC1YVV/CP/W vector wa... |
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| Keywords: | pC1YVV/CP/W pC1YVV/CP/W/GFP |
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