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第28期鸡胚原始生殖细胞的分离培养
引用本文:丁志丽,采克俊,刘莉,张易祥,张念慈.第28期鸡胚原始生殖细胞的分离培养[J].安徽农业科学,2009(2):519-521.
作者姓名:丁志丽  采克俊  刘莉  张易祥  张念慈
作者单位:湖州师范学院生命科学学院,浙江湖州,313000
基金项目:国家自然科学基金(30500270); 浙江省自然科学基金项目(Y304194); 湖州师范学院校级课题(KX23027); 浙江省教育厅科研项目(20070479)
摘    要:目的]进一步优化生殖细胞(PGCs)细胞体外培养条件。方法]从第28期(5.5d)鸡胚生殖嵴分离PGCs,将PGCs与性腺基质细胞共培养进行原代培养,比较2种培养温度和3种培养浓度对PGCs原代培养的影响,以及2种饲养层细胞对PGCs传代培养的影响,并通过倒置显微镜下形态学观察、碱性磷酸酶(AKP)和过碘酸希夫反应(PAS)染色方法鉴定PGCs。结果]培养浓度为2.5×10^5个/ml和培养温度为37℃时PGCs增殖较多,不易分化,存活能力较强,以第2代鸡胚成纤维细胞作饲养层时传代培养效果较好,获得了PGCs增殖的未分化集落,为后期的细胞标记及移植研究提供了较多数量和较高活力的PGCs。结论]获得了PGCs原代与传代培养较好的培芥体系,为禽类EG细胞系的建立和转基因研究奠定了基础。

关 键 词:鸡胚  原始生殖细胞  培养

Isolation and Culture of Primordial Germ Cells of Chicken Embryo at 28th Stage
DING Zhi-li et al.Isolation and Culture of Primordial Germ Cells of Chicken Embryo at 28th Stage[J].Journal of Anhui Agricultural Sciences,2009(2):519-521.
Authors:DING Zhi-li
Institution:DING Zhi-li et al(School of Life Science,Huzhou Teachers College,Huzhou,Zhejiang 313000)
Abstract:Objective] The study aimed to optimize the conditions for culture in vitro of primordial germ cells(PGCs).Method] PGCs were isolated from the genital ridges of chicken embryos at the 28th stage(5.5 d),then they were co-cultured with gonad stroma cells for primary culture.The effect of 2 kinds of culture temperatures and 3 kinds of culture concn.on PGCs primary culture and that of 2 kinds of feeder layer cells on PGCs subculture were compared.PGCs were identified by morphologic observation under inverted m...
Keywords:Chicken embryo  Primordial germ cells  Culture  
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