口蹄疫病毒A型AF/72株衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达及鉴定 |
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引用本文: | 张庆勋,刘新生,方玉珍,王永录,张永光.口蹄疫病毒A型AF/72株衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达及鉴定[J].安徽农业科学,2015(26). |
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作者姓名: | 张庆勋 刘新生 方玉珍 王永录 张永光 |
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作者单位: | 中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃兰州730046;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃兰州730046;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃兰州730046;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃兰州730046;中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃兰州730046 |
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基金项目: | 十二五863计划项目“家畜口蹄疫新型疫苗研制与生产工艺创新”(2011AA10A211),重大动物疫病疫苗临床免疫评价技术研究与示范项目(201203039),国家生猪产业体系项目(CARS-36-06B),甘肃省国际科技合作计划项目(1011WCGA160) |
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摘 要: | 通过限制性酶切位点将P12A和3C基因插入到带有双启动子(Pp10和PPH)的杆状病毒表达载体p Fast BacTMDual,转化E.coli DH10感受态细胞进行蓝白斑筛选,将鉴定正确的重组杆状病毒质粒转染Sf9细胞后收获重组杆状病毒r Bac-Dual-P12A3C,通过间接免疫荧光(IFA)和蛋白质印迹(Western-blot)检测衣壳蛋白的表达。IFA结果表明表达产物能够被A型FMDV猪抗阳性血清所识别,鉴定正确并具有良好反应原性。Western-blot检测到81 k D(P12A)、57 k D(VP0+VP3)、47 k D(VP3+VP1)、33 k D(VP0)和24 k D(VP1/VP3)5条蛋白条带,与预期相符。该研究为进一步研究A型口蹄疫病毒空衣壳的体外组装提供了试验依据。
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关 键 词: | 口蹄疫病毒 衣壳蛋白 检测 |
Expression and Identification of Capsid Protein of AF/72 Strain of Foot-and-mouth Disease Virus Type A in Insect Cells |
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Abstract: | |
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Keywords: | Foot-and-mouth disease virus Capsid protein Detection |
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