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油楠基因组DNA提取·ISSR反应体系优化及引物筛选
引用本文:吴忠锋,杨锦昌,尹光天,李荣生,邹文涛,袁洁.油楠基因组DNA提取·ISSR反应体系优化及引物筛选[J].安徽农业科学,2015(26).
作者姓名:吴忠锋  杨锦昌  尹光天  李荣生  邹文涛  袁洁
作者单位:广州市林业和园林科学研究院,广东广州,510405;中国林业科学研究院热带林业研究所,广东广州,510520
基金项目:热带林业研究所基本科研业务费专项(RITFYWZX201206),林业行业专项(201304604),广州市林业和园林局科研项目
摘    要:目的]对油楠基因组DNA提取、ISSR反应体系优化及引物筛选进行探讨。方法]运用改良CTAB法对油楠树皮进行基因组DNA提取,利用单因素试验,对油楠ISSR-PCR反应各因素水平进行优化。结果]运用改良CTAB法对油楠树皮进行基因组DNA提取效果最佳;最优体系:20μl反应体系中,模板用量20 ng,引物浓度0.6μmol/L,d NTPs浓度0.2 mmol/L,Mg2+浓度2.0 mmol/L,Taq酶用量1.5 U,10倍反应缓冲液2μl,dd H2O补至20μl;以该体系为基础进行引物筛选,在100条ISSR随机引物中筛选出13条多态性较高、扩增条带清晰、重复性好的引物。结论]该研究丰富了油楠遗传学基本资料,为油楠遗传多样性研究奠定基础。

关 键 词:油楠  DNA提取  ISSR-PCR  优化

DNA Extraction,Optimization of ISSR-PCR System and Primers Screening of Sindora glabra
Abstract:
Keywords:Sindora glabra  DNA extraction  ISSR-PCR  Optimization
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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