| 北五味子RAPD-PCR反应条件优化 |
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| 引用本文： | 伊旭,金东淳,武立丹,周桐.北五味子RAPD-PCR反应条件优化[J].延边大学农学学报,2009,31(1):6-9. |
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| 作者姓名： | 伊旭 金东淳 武立丹 周桐 |
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| 作者单位： | 延边大学农学院,吉林,龙井,133400 |
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| 基金项目： | 延边大学留学回国启动基金 |
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| 摘 要： | 以采自吉林省汪清地区野生北五味子叶片为材料，提取其基因组DNA，并以此为模板进行北五味子RAPD—PCR反应条件的优化．结果表明，PCR反应混合液为：25μLPCR反应体系中加入20ng模板DNA，200μmol／LdNTPs，0．3μmol／L引物，2．0mmol／LMg^2＋，1UTaqDNA聚合酶，2．5μL 10×Buffer；PCR反应程序为：94℃预变性5min后，在94℃变性1rain，40℃退火1min，72℃延伸2min，共40个循环后，在72℃下最后延伸5min时，在不同引物中均扩增出清晰而稳定的DNA电泳谱带．
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| 关 键 词： | 北五味子 基因组DNA RAPD-PCR |
Optimization of RAPD-PCR reaction system of Schisarutra chinesis(Turcz.)Baill |
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| YI Xu,JING Dong-chun,WU Li-dan,ZHOU Tong.Optimization of RAPD-PCR reaction system of Schisarutra chinesis(Turcz.)Baill[J].Journal of Agricultural Science Yanbian University,2009,31(1):6-9. |
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| Authors: | YI Xu JING Dong-chun WU Li-dan ZHOU Tong |
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| Institution: | (Agricultural College of Yanbian University ,Longjing JiLin 133400,China) |
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| Abstract: | The optimal RAPD-PCR reaction system of Schisarutra chinesis （Turcz.） Baill was established with genomic DNA extracted from fresh leaves. The results indicated that in total 25μL volumes of PCR reaction, contain 20 ng of DNA, 200 μmol/L of dNTPs, 0.3 μmol/L of primers, 2.0 mmol/L of Mg^2＋ , 1 unit of TaqDNA polymerase, 2.5μL of 10 ）〈 Buffer ; and the PCR program is after predenaturing at 94℃ for 5 min, followed by 40 cycles of denaturing at 94 ℃ for 1 min,annealing at 40 ℃ for 1 min,extension at 72℃ for 2 min,and final extension at 72℃ for 5 min. |
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| Keywords: | RAPD-PCR |
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