| 广西巴马小型猪ANK1基因启动子克隆及其活性分析 |
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| 引用本文： | 李龙,司景磊,夏攀洁,綦文晶,龙开旭,夏利,何剑雄,吴敏,兰干球.广西巴马小型猪ANK1基因启动子克隆及其活性分析[J].南方农业学报,2017,48(4). |
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| 作者姓名： | 李龙 司景磊 夏攀洁 綦文晶 龙开旭 夏利 何剑雄 吴敏 兰干球 |
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| 作者单位： | 广西大学 动物科学技术学院,南宁,530004 |
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| 基金项目： | 国家现代农业产业技术体系广西巴马小型猪产业创新团队建设项目，广西科学研究与技术开发计划项目 |
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| 摘 要： | 【目的】克隆广西巴马小型猪ANK1基因启动子,确定其活性核心区,为研究ANK1基因启动子与肉质性状的相关性及构建动物疾病模型打下基础。【方法】通过在线软件对ANK1基因启动子的转录因子结合位点进行预测,根据转录因子结合位点设计特异引物扩增不同长度的ANK1基因启动子片段,并利用双荧光素酶试剂盒检测其荧光值,以确定不同ANK1基因启动子片段的活性。【结果】发现ANK1基因启动子存在1个转录起始位点(TSS)、2个Cp G岛和多个转录因子结合位点,并以此作为ANK1基因启动子的分段依据,将其分割为P638、P791、P1113、P1163、P1648、P1694、P1796和P2074等8个不同长度的目的片段。成功克隆获得的8个ANK1基因启动子片段经KpnⅠ和HindⅢ双酶切、T4真核表达载体连接、细胞转染等方法构建8个双荧光素酶重组报告基因,双荧光素酶试剂盒检测结果显示,广西巴马小型猪ANK1基因启动子在P1796片段活性最强,与其他片段存在显著差异(P0.05)。【结论】成功克隆获得广西巴马小型猪ANK1基因启动子的8个片段,且利用双荧光素酶试剂盒检测确定其核心启动子区域出现在P1796片段。
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| 关 键 词： | 广西巴马小型猪 锚蛋白(ANK) ANK1基因 启动子 活性分析 |
ANK1 gene promoter in Guangxi Bama miniature pig:Cloning and activity analysis |
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| LI Long,SI Jing-lei,XIA Pan-jie,QI Wen-jing,LONG Kai-xu,XIA Li,HE Jian-xiong,WU Min,LAN Gan-qiu.ANK1 gene promoter in Guangxi Bama miniature pig:Cloning and activity analysis[J].Journal of Southern Agriculture,2017,48(4). |
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| Authors: | LI Long SI Jing-lei XIA Pan-jie QI Wen-jing LONG Kai-xu XIA Li HE Jian-xiong WU Min LAN Gan-qiu |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Guangxi Bama miniature pig ankyrins(ANK) ANK1 gene promoter activity analysis |
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