| 蒜芥茄SsWRKY1基因克隆及黄萎病病原菌胁迫下表达分析 |
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| 引用本文： | 尹梦莹,蔚亚楠,杜光辉,桂敏,黎志彬,鲍锐,龚亚菊,吴丽艳.蒜芥茄SsWRKY1基因克隆及黄萎病病原菌胁迫下表达分析[J].南方农业学报,2022,53(4):1000-1010. |
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| 作者姓名： | 尹梦莹 蔚亚楠 杜光辉 桂敏 黎志彬 鲍锐 龚亚菊 吴丽艳 |
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| 作者单位： | 1 云南省农业科学院园艺作物研究所, 云南昆明 650205;2 云南大学资源植物研究院, 云南昆明 650500 |
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| 基金项目： | 云南省农业基础研究联合专项面上项目(2018FG001-022)云南省应用基础研究面上项目(2019FB059)国家自然科学基金地区基金项目(31960594) |
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| 摘 要： | 【目的】克隆蒜芥茄WRKY1基因(SsWRKY1),并分析其在黄萎病病原菌胁迫下的表达模式,为探究WRKY1基因在野生蒜芥茄黄萎病抗性中的调控机制提供理论参考。【方法】利用染色体步移技术克隆SsWRKY1基因,通过在线生物信息学软件进行序列分析及构建系统发育进化树;采用GFP融合蛋白表达法对WRKY1蛋白进行亚细胞定位,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SsWRKY1基因在不同组织及接种黄萎病病原菌后不同时间的相对表达量。并分析9种野生茄材料接种黄萎病病原菌后的病情指数与WRKY1基因表达变化量的相关性。【结果】克隆获得的SsWRKY1基因(GenBank登录号MZ846202)ORF序列长度为1224 bp,编码407个氨基酸残基,蛋白相对分子量为44.87 kD,理论等电点(p I)为6.91,属于亲水性不稳定蛋白,亚细胞定位于细胞核,符合转录因子特征。SsWRKY1蛋白含有2个WRKY保守结构域和C2H2型锌指结构,属于Ⅰ类WRKY转录因子,其二级结构主要由α-螺旋(7.13%)、β-折叠(4.67%)、无规则卷曲(73.71%)和延伸链(14.50%)组成。SsWRKY1蛋白与番茄、野生潘那利番茄、野生番茄、马铃薯WRKY1蛋白的亲缘关系较近。SsWRKY1基因在根和茎的相对表达量显著高于叶中的相对表达量(P<0.05,下同)。黄萎病病原菌接种后不同时间,SsWRKY1基因的相对表达量均低于对照组(无菌水接种),但仅在24 h时二者差异达显著水平。9种野生茄材料接种黄萎病病原菌后的病情指数与接种前后WRKY1基因表达变化量间呈显著正相关。【结论】SsWRKY1属于第Ⅰ类WRKY转录因子,序列高度保守,在细胞核中表达,其基因具有组织表达特异性,黄萎病菌胁迫后该基因的表达下调,推测WRKY1在野生茄黄萎病抗性中起负调控作用。
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| 关 键 词： | 蒜芥茄 WRKY转录因子 黄萎病 基因克隆 亚细胞定位 表达分析 |
| 收稿时间： | 2021-09-17 |
Cloning and expression analysis of SsWRKY1 gene in Solanum sisymbriifolium under stress of verticillium wilt disease |
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| YIN Meng-ying,YU Ya-nan,DU Guang-hui,GUI Min,LI Zhi-bin,BAO Rui,GONG Ya-ju,WU Li-yan.Cloning and expression analysis of SsWRKY1 gene in Solanum sisymbriifolium under stress of verticillium wilt disease[J].Journal of Southern Agriculture,2022,53(4):1000-1010. |
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| Authors: | YIN Meng-ying YU Ya-nan DU Guang-hui GUI Min LI Zhi-bin BAO Rui GONG Ya-ju WU Li-yan |
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| Institution: | 1 Horticultural Research Institute, Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Kunming, Yunnan 650205,China;2 Institute of Resource Plants, Yunnan University,Kunming, Yunnan 650500,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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