| 聚乙二醇介导咖啡炭疽菌遗传转化体系的建立 |
| |
| 引用本文： | 陆英,贺春萍,吴伟怀,梁艳琼,黄兴,郑金龙,李锐,易克贤.聚乙二醇介导咖啡炭疽菌遗传转化体系的建立[J].南方农业学报,2020,51(11):2706-2712. |
| |
| 作者姓名： | 陆英 贺春萍 吴伟怀 梁艳琼 黄兴 郑金龙 李锐 易克贤 |
| |
| 作者单位： | 中国热带农业科学院环境与植物保护研究所/农业农村部热带农林有害生物入侵检测与控制重点开放实验室/海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室,海口 571101 |
| |
| 摘 要： | 目的]建立高效制备咖啡炭疽菌原生质体及聚乙二醇(PEG)介导的遗传转化体系的方法,为开展咖啡炭疽菌的致病分子机理研究打下基础.方法]以咖啡炭疽菌野生型菌株BSC2-2为试验材料,通过PEG介导原生质体转化法将含有氯嘧磺隆标记和绿色荧光蛋白报告基因(GFP)的质粒pCB1532-G转入BSC2-2原生质体中,对获得的转化子进行遗传稳定检测、PCR分子检测和激光共聚焦显微观察.结果]BSC2-2对氯嘧磺隆的耐受浓度为200.0 mg/L.最佳遗传转化体系为:28℃下用2.5%裂解酶酶解BSC2-2菌丝2 h,收集原生质体,再经MTC缓冲液冲洗重悬后将质粒pCB1532-G转入原生质体,在RM培养基中混匀再生,获得转化子.GFP基因的PCR扩增和分生孢子荧光观察结果表明,GFP基因已成功插入并整合到咖啡炭疽菌BSC2-2基因组中.转化子与野生型菌株在菌落形态、生长速率及致病力上无明显差别,表明GFP基因在咖啡炭疽菌BSC2-2基因组中稳定遗传.结论]成功建立了PEG介导的咖啡炭疽菌遗传转化体系,获得与野生型菌株在菌落形态、生长速率及致病性上无明显差别的转化子,为后续研究咖啡炭疽菌的基因功能和致病机理提供技术支持.
|
| 关 键 词： | 咖啡炭疽菌 PEG介导遗传转化 转化子鉴定 生长 致病性 |
Establishment of genetic transformation system of coffee Collectotrichum using polyethylene glycol-mediated method |
| |
| LU Ying,HE Chun-ping,WU Wei-huai,LIANG Yan-qiong,HUANG Xing,ZHENG Jin-long,LI Rui,YI Ke-xian.Establishment of genetic transformation system of coffee Collectotrichum using polyethylene glycol-mediated method[J].Journal of Southern Agriculture,2020,51(11):2706-2712. |
| |
| Authors: | LU Ying HE Chun-ping WU Wei-huai LIANG Yan-qiong HUANG Xing ZHENG Jin-long LI Rui YI Ke-xian |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
|
| 点击此处可从《南方农业学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《南方农业学报》下载免费的PDF全文 |
|
