活体采卵时间间隔对牛克隆胚胎发育的影响

采用活体穿刺技术（ovum pick up，OPU），分别间隔3／4（1周2次）、5、7、10、14d对同一批荷斯坦奶牛进行穿刺采卵，根据优势卵泡直径和所有卵丘细胞-卵母细胞复合体的状态确定采卵时卵泡所处的发育阶段，从而确定卵泡波的发育动态变化。并以间隔不同时间采卵获得的卵母细胞成熟后进行体细胞核移植（somatic cell nuclear transfer，SCNT）制备克隆牛胚胎。重构胚体内培养7d后，通过比较克隆囊胚的发育率判定卵母细胞质量的差异，从而确定最佳的采卵时间间隔。结果显示：①穿刺采集所有直径超过3min的卵泡后，可起始1个新卵泡波，大约5d后从属卵泡开始进入凋亡阶段，7d后进入晚期凋亡阶段，第7～10d又起始1个新的卵泡波，第14d时第2个卵泡波中的从属卵泡起始凋亡。②间隔不同时间组克隆囊胚发育率存在差异，间隔3／4d（1周2次）为23．1％，间隔5d组为15．0％，间隔7d组为10．9％，间隔10d组为4．9％，间隔14d组为29．0％。结果显示：间隔不同的时间采卵，卵泡所处的发育状态存在差异。并对卵母细胞质量具有显著的影响。