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猪水泡病病毒RT-PCR检测方法的建立
作者姓名:钟金栋  花群义  夏雪山  杨云庆  周晓黎  董 俊
作者单位:昆明理工大学生化学院 云南昆明650224(钟金栋,夏雪山),云南省出入境检验检疫局技术中心 云南昆明650228(花群义,杨云庆,周晓黎,董俊)
基金项目:国家“十五”重大科技攻关项目“食品安全技术研究后期滚动课题”(No.2001BA804A48)
摘    要:根据基因库中的猪水泡病病毒(SVDV)高度保守的VP1基因的序列,设计了与SVDV互补的2对特异性引物,通过对影响PCR扩增因素的筛选,成功地扩增出251bp和366bp特异性条带,将其克隆入pMD18-T载体中,并进行序列测定,与已发表的SVDV基因比较发现,核苷酸的同源性为100%,证实为SVDV的VP1段基因。通过检测FMDV、VSV、BHK21细胞等,对照的扩增结果均为阴性,验证其特异。对SVDVRNA进行10倍系列稀释后检测,结果SVDVRNA在10-4稀释度时仍能检测到阳性,说明具有较好的敏感性。此项试验能稳定、高效、快速地检测出猪水泡病病毒。

关 键 词:猪水泡病病毒  RT-PCR  检测

Establishment of Rapid Detection of SVDV by RT-PCR
Authors:Zhong Jindong  Hua Qunyi  Xia Xueshan  Yang Yunqing  Zhou Xiaoli  Dongjun
Institution:1 Faculty of Bioengineering and Chemical Engineering, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650224; 2 Technology Center of Yunnan Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Kunming 650228
Abstract:
Keywords:Swine vesicular disease virus  RT-PCR  Detection
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