鲤鱼AFLP-银染体系的建立与优化 |
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作者姓名: | 慧萍 傅洪拓 李法君 乔 慧 姚建华 |
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作者单位: | 李慧萍,李法君,乔慧,姚建华,Li Huiping,Li Fajun,Qiao Hui,Yao Jianhua(南京农业大学无锡渔业学院,江苏无锡,214081);傅洪拓,Fu Hongtuo(中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室,江苏无锡,214081)
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摘 要: | 以鲤科鱼类建鲤为材料,对扩增片断长度多态性(AFLP)反应体系进行优化,建立适合于鲤鱼的AFLP反应体系.通过对AFLP常规流程中基因组DNA提取、酶切.连接、预扩、选扩及电泳-银染过程的优化,初步建立了适合鲤鱼的AFLP分析体系:采用鲤血细胞DNA提取;MseI和EcoRI 37 ℃双酶切5 h;预扩引物为E+A和M+C;选扩引物E+3与M+3浓度配比为1:8,为提高引物与模板的结合效率,选扩程序均采用touch-down程序;最后结合经典AgNO3-Na2CO3银染显色.通过优化的AFLP程序,从64对引物中筛选出8对多态性引物,为进一步的鲤鱼种质资源研究奠定基础.
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关 键 词: | 鲤鱼 银染体系 |
Construction of AFLP Silver-staining Analysis System in Common Carp |
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Authors: | Li Huiping Fu Hongtuo Li Fajun Qiao Hui Yao Jianhua |
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Abstract: | |
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Keywords: | AFLP |
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