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牛奶样品布氏杆菌套式PCR检测方法的建立
引用本文:杜振昆,郭军庆,张妙仙,项玉燕,周继勇.牛奶样品布氏杆菌套式PCR检测方法的建立[J].浙江大学学报(农业与生命科学版),2008,34(2):169-174.
作者姓名:杜振昆  郭军庆  张妙仙  项玉燕  周继勇
作者单位:1. 浙江大学动物预防医学研究所,浙江,杭州,310029;新疆农业大学动物医学学院,新疆,乌鲁木齐,830052
2. 浙江大学动物预防医学研究所,浙江,杭州,310029
3. 金华市畜牧兽医局,浙江,金华,321017
基金项目:浙江省重大科技攻关资助项目(2005C12009-02)
摘    要:    为建立从奶品中监控布氏杆茵感染的方法,根据牛布氏杆菌omp25、omp31和16S rRNA基因序列设计内、外向引物,优化牛奶样品中布氏杆菌基因组DNA提取方法,建立牛奶样品布氏杆菌套式PCR方法结果显示,使用人工合成的两对F4/R2和F2D/R1U套式引物,通过两次扩增,可有效扩增出牛奶中污染布氏杆菌的16S rRNA的特异性DNA片段,其对牛奶样品中布氏杆菌检测下限达33CFUmL-1.该套式PCR与大肠杆菌、溶血性链球菌、沙门氏茵、克雷伯氏杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和螺旋杆菌等相关细菌DNA无交叉反应,显示高度的布氏杆菌特异性,其与布氏杆菌分离鉴定的符合率达100%本试验建立的布氏杆菌套式PCR检测方法具有较好的特异性和敏感性,适用于牛奶样品中布氏杆菌的实验室快速检测

关 键 词:布氏杆菌  套式PCR  牛奶
文章编号:1008-9209(2008)02-0169-06
修稿时间:2007年4月4日

Nested-PCR for detection of Brucella in milk
DU Zhen-kun,GUO Jun-qing,ZHANG Miao-xian,XIANG Yu-yan,ZHOU Ji-yong.Nested-PCR for detection of Brucella in milk[J].Journal of Zhejiang University(Agriculture & Life Sciences),2008,34(2):169-174.
Authors:DU Zhen-kun  GUO Jun-qing  ZHANG Miao-xian  XIANG Yu-yan  ZHOU Ji-yong
Abstract:
Keywords:Brucella  nested-PCR  milk
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