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猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白特异性卵黄抗体的制备与鉴定
引用本文:万晓媛,扈鸿霞,陈宁,邹晓庭,李肖梁.猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白特异性卵黄抗体的制备与鉴定[J].浙江大学学报(农业与生命科学版),2010,36(3):269.
作者姓名:万晓媛  扈鸿霞  陈宁  邹晓庭  李肖梁
作者单位:1. 浙江大学,动物科学学院,动物分子营养学教育部重点实验室,浙江,杭州,310029
2. 浙江大学,动物科学学院,浙江省动物预防医学重点实验室,浙江,杭州,310029
基金项目:浙江省科技厅重大专项资助项目 
摘    要:将猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)核衣壳蛋白(nucleocapsid protein,NP)的基因片段克隆至载体pET-30a,转化重组质粒至Escherichia coli BL21(DE3)表达融合蛋白6×His-N,并以其为抗原免疫蛋鸡,制备特异性抗PRRSV-N卵黄抗体(egg yolk immunoglobulin,IgY).结果显示:6×His-N在BL21中的表达量为60.2mg·L-1;将纯化浓缩的6×His-N与弗氏佐剂乳化,连续3次免疫海兰蛋鸡后,经ELISA检测,首免后第36天抗6×His-NIgY抗体为阳性(P/N=2.44);第83天的P/N值达到最高,为5.63,抗体经1:640稀释后,P/N值为2.29;经SDS-PAGE和Western blot分析,提取的卵黄抗体的纯度高且具有良好的免疫反应性.研究表明,抗PRRSV-N蛋白的IgY制备具有简便、成本低廉等特点,可用于PRRSV检测试剂盒的开发.

关 键 词:猪呼吸与繁殖综合征病毒  核衣壳蛋白  卵黄抗体

Generation and characterization of specific chicken egg yolk immunoglobulins against nucleocapsid protein of porcine reproductive and respiratory syndrome virus
WAN Xiao-yuan,HU Hong-xia,CHEN Ning,ZOU Xiao-ting,LI Xiao-liang.Generation and characterization of specific chicken egg yolk immunoglobulins against nucleocapsid protein of porcine reproductive and respiratory syndrome virus[J].Journal of Zhejiang University(Agriculture & Life Sciences),2010,36(3):269.
Authors:WAN Xiao-yuan  HU Hong-xia  CHEN Ning  ZOU Xiao-ting  LI Xiao-liang
Abstract:
Keywords:ELISA
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