| 褐飞虱抗原检测最佳ELISA条件的建立 |
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| 引用本文： | 赵伟春,程家安,陈正贤.褐飞虱抗原检测最佳ELISA条件的建立[J].浙江大学学报(农业与生命科学版),2002,28(6):629-634. |
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| 作者姓名： | 赵伟春 程家安 陈正贤 |
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| 作者单位： | 1. 浙江大学,应用昆虫学研究所,浙江,杭州,310029
2. 浙江大学,生物技术研究所,浙江,杭州,310029 |
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| 基金项目： | 国家973和RiceIPMNetwork资助项目(G2000016210). |
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| 摘 要： | 应用褐飞虱单克隆抗体3B2和4B8比较了直接、间接和多种抗体夹心ELISA方法.结果表明:当拟环纹豹蛛稀释512倍(含拟环纹豹蛛0.04 mg/mL)时,直接和间接ELISA的OD值比阳性对照仍降低5%以上.而当捕食者稀释100倍时,对同种单抗、异种单抗和两种单抗混合夹心ELISA检测OD值的影响均小于5%.在加入100倍豹蛛稀释液时,3种抗体夹心ELISA检测灵敏度均为16.90 ng/mL(1/17509头褐飞虱雌成虫),直接和间接ELISA分别为:67.59 ng/mL (1/4378头)和135.18 ng/mL (1/2189头).建立了4B8稀释1000倍(28.13 μg/mL),捕食者匀浆液定容至1 mL/头后再稀释100倍,HRP-4B8稀释4000倍(1.04 μg/mL)的夹心ELISA用于检测捕食者肠道中的褐飞虱抗原.在此系统下,检测灵敏度为每头拟环纹豹蛛含1.69 μg猎物蛋白(1/175头褐飞虱雌成虫),非目标抗原的影响小于5%.
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| 关 键 词： | 褐飞虱 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验 灵敏度 非目标抗原 |
| 文章编号： | 1008-9209(2002)06-0629-06 |
| 修稿时间： | 2001年4月17日 |
Calibration of a suitable enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) for Nilaparvata lugens (stl) antigen detection |
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| ZHAO Wei chun ,CHENG Jia an ,CHEN Zheng xian.Calibration of a suitable enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) for Nilaparvata lugens (stl) antigen detection[J].Journal of Zhejiang University(Agriculture & Life Sciences),2002,28(6):629-634. |
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| Authors: | ZHAO Wei chun CHENG Jia an CHEN Zheng xian |
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| Institution: | ZHAO Wei chun 1,CHENG Jia an 1,CHEN Zheng xian 2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Nilaparvata lugens monoclonal antibody ELISA sensitivity non target antigen |
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