| 2种猪冠状病毒双重RTGPCR检测方法的建立与应用 |
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| 引用本文： | 温海京,贾超伟,刘芊麟,张喜喜,刘鑫宇,周双海.2种猪冠状病毒双重RTGPCR检测方法的建立与应用[J].北京农学院学报,2019(1). |
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| 作者姓名： | 温海京 贾超伟 刘芊麟 张喜喜 刘鑫宇 周双海 |
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| 作者单位： | 北京农学院动物科学技术学院;门头沟区动物疫病预防控制中心;遵义市红花岗区南关街道办...;安徽省农业科学院畜牧兽医...;上海市农业科学院畜牧兽医...;北京农学院动物科学技术学...;上海市农业科学院畜牧兽医...;广西大学动物科技学院;广...;山东农业大学动物医学院/...;湖南南县养殖场;;石河子大学动物科技学院;...;上海交通大学农业与生物学... |
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| 摘 要： | 【目的】建立一种可同时检测2种猪冠状病毒即猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的双重RT-PCR检测方法并进行临床应用。【方法】对TGEV和PEDV的单项RT-PCR方法分别进行条件优化后对2种病毒的双重RTGPCR进行条件优化并进行特异性与敏感性试验，然后用单项RT-PCR方法和双重RT-PCR对临床样品进行比较检测。【结果】双重RT-PCR检测方法的PEDV与TGEV的检测敏感度分别为59、49 copies/mL,该方法对当前常见猪源RNA病毒的检测结果都为阴性.该方法对2013—2016年18个猪场的235份仔猪腹泻样品的检测结果显示，PEDV和TGEV的个体阳性率分别为73.6%和2.1%,与单项RT-PCR方法检测结果无显著性(Pgt;0.05)差异，临床样品中PEDV的猪场阳性率与个体阳性率都极显著(Plt;0.01)高于TGEV。【结论】建立了一种有较高灵敏性与特异性的PEDV与TGEV的双重RT-PCR检测方法，近年来猪传染性腹泻样品中PEDV检出率极显著高于TGEV。
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