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珍稀濒危植物香果树RAPD反应条件的优化
引用本文:杨敬元,熊丹,梁宏伟,王玉兵,廖明尧,陈发菊.珍稀濒危植物香果树RAPD反应条件的优化[J].浙江林学院学报,2007,24(3):279-283.
作者姓名:杨敬元  熊丹  梁宏伟  王玉兵  廖明尧  陈发菊
作者单位:1. 湖北省神农架自然保护区,管理局,湖北,神农架,442421
2. 三峡大学生物技术中心-湖北省天然产物利用与研究重点实验室,湖北,宜昌,443002
基金项目:湖北省宜昌市科学技术重点攻关项目
摘    要:以采自湖北省神农架地区的14株香果树Emmenopterys henryi为材料,提取其叶片基因组DNA,并以其基因组DNA为模板进行随机扩增多态性DNA(RAPD)反应条件的优化。RAPD反应条件中的各个因子,包括模板DNA质量浓度、引物浓度、dNTP浓度、DNA聚合酶浓度和Mg2 浓度。结果表明,香果树基因组DNA在以下条件有较好的扩增效果:25μL体系中,Taq酶1.33×10-3kat.L-1;随机引物0.5μmol.L-1;Mg2 2.6 mmol.L-1;dNTP 220μmol.L-1;DNA模板4.40 mg.L-1。聚合酶链式反应(PCR)程序为:94℃预变性5 min,94℃变性1 min,43℃退火1 min,72℃延伸2 min,经过40个循环,最后72℃延伸8 min。此体系和反应程序可获得比较稳定的扩增结果。图6表1参8

关 键 词:植物学  香果树  基因组DNA  随机扩增多态性DNA
文章编号:1000-5692(2007)03-0279-05
收稿时间:2006-09-18
修稿时间:2006-09-182006-12-12

Optimal reaction system for random amplified polymorphic DNA with endangered Emmenopterys henryi
YANG Jing-yuan,XIONG Dan,LIANG Hong-wei,WANG Yu-bing,LIAO Ming-yao,CHEN Fa-ju.Optimal reaction system for random amplified polymorphic DNA with endangered Emmenopterys henryi[J].Journal of Zhejiang Forestry College,2007,24(3):279-283.
Authors:YANG Jing-yuan  XIONG Dan  LIANG Hong-wei  WANG Yu-bing  LIAO Ming-yao  CHEN Fa-ju
Abstract:
Keywords:botany  Emmenopterys henryi(Henry emmenoterys)  genomic DNA  random amplified polymorphic DNA(RAPD)
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