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黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织Dazl基因实时荧光定量PCR检测方法的建立
引用本文:付 永,魏雅萍,孟 茹,吴克选,陈生梅,张立成,王谢忠.黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织Dazl基因实时荧光定量PCR检测方法的建立[J].西北农业学报,2013,22(1):12-18.
作者姓名:付 永  魏雅萍  孟 茹  吴克选  陈生梅  张立成  王谢忠
作者单位:青海省畜牧兽医科学院;西宁市畜牧兽医站;青海省动物疫病预防控制中心
基金项目:国家星火计划(2010GA870003);青海省科技计划项目(2010-Z-718);青海省犏牛示范项目(青农函[2010]395号)
摘    要:为了检测黄牛、牦牛和犏牛睾丸组织Dazl基因mRNA表达水平。利用GenBank中牛Dazl mRNA序列,在其保守区设计并合成特异性引物,以牛肌动蛋白基因(β-actin)为内参,建立实时荧光定量PCR方法。结果表明,在100~10-6 7个拷贝量重组质粒稀释范围内,Dazl和β-actin基因的Ct值与重组质粒的含量均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999。熔解曲线产物为特异的单峰,具有较高的灵敏度和特异性。Dazl基因重组质粒最小检出含量达到10拷贝/μL,批内变异系数保持在1.351%以内,批间变异系数保持在3.217%以内,重复性较好。Dazl基因的mRNA表达量在犏牛睾丸组织中最低,这一分布可能与犏牛精子发生过程中减数分裂调控作用相关。

关 键 词:犏牛  雄性不育  Dazl  荧光实时定量PCR

Establishment of a Real time PCR Assay for Detection of Dazl in Cattle, Yak and Cattle yak Testis
FU Yong,WEI Yaping,MENG Ru,WU Kexu,CHEN Shengmei,ZHANG Licheng and WANG Xiezhong.Establishment of a Real time PCR Assay for Detection of Dazl in Cattle, Yak and Cattle yak Testis[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2013,22(1):12-18.
Authors:FU Yong  WEI Yaping  MENG Ru  WU Kexu  CHEN Shengmei  ZHANG Licheng and WANG Xiezhong
Institution:1.Qinghai Academy of Animal and Veterinary Science,Xining 810016,China;2.Animal Husbandry and Veterinary Station of Xining,Xining 810016,China;3.Qinghai Animal Disease Control Center,Xining 810001,China)
Abstract:
Keywords:
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