| 苦荞查尔酮合成酶多克隆抗体制备及组织表达分析 |
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| 引用本文： | 李 蒙,陈 鹏.苦荞查尔酮合成酶多克隆抗体制备及组织表达分析[J].西北农业学报,2022(11):1491-1498. |
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| 作者姓名： | 李 蒙 陈 鹏 |
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| 作者单位： | （1.西安文理学院 生物与环境工程学院，西安 710065； 2.西北农林科技大学 生命科学学院，陕西杨凌 712100） |
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| 基金项目： | 陕西省教育厅自然科学专项（20JK0876）；陕西省航天育种工程中心（HTYZ2102）；西安文理学院三年行动计划项目（21XJZZ0001-13）。 |
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| 摘 要： | 苦荞查尔酮合成酶（FtCHS）是黄酮类化合物合成过程中的限速酶之一，在苦荞黄酮类次生代谢物合成中起到重要作用。以苦荞种子灌浆期cDNA为模板，采用RT-PCR方法克隆获得FtCHS基因，通过生物信息学分析确定FtCHS的截短抗原基因序列（TrCHS）。再通过原核表达、亲和层析等方法制备并纯化TrCHS抗原，以纯化的抗原免疫大白兔获得TrCHS的多克隆抗体，利用半定量RT-PCR、Western blotting方法分析苦荞不同器官FtCHS的表达情况。结果表明，成功克隆FtCHS基因开放阅读框（ORF）大小为 1 182 bp，共编码393个氨基酸，通过原核表达获得TrCHS抗原的分子质量约34.71 ku，所制备的多克隆抗体具有较高的特异性， FtCHS基因在苦荞叶子、种子的表达量明显最高。
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| 关 键 词： | 苦荞 查尔酮合成酶 原核表达 抗体制备 组织表达 |
Preparation of Polyclonal Antibody and Tissue Expression Analysis of Chalcone Synthase from Tartary Buckwheat |
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| LI Meng,and CHEN Peng.Preparation of Polyclonal Antibody and Tissue Expression Analysis of Chalcone Synthase from Tartary Buckwheat[J].Acta Agriculturae Boreali-occidentalis Sinica,2022(11):1491-1498. |
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| Authors: | LI Meng and CHEN Peng |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Tartary buckwheat CHS Prokaryotic expression Polyclonal antibody Tissue expression |
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